Многим из нас знаком золотарник канадский. Это многолетнее травянистое растение, верхушка которого украшена солнечно-золотистыми соцветиями.

В качестве декоративного оно используется многими садоводами. Его пышные дугообразные цветоносы украшают многие клумбы до самой глубокой осени. Радуют глаз эти растения и в срезке, и в зимнем букете. Однако такой милый цветок считают не только декоративным. Альтернативная и традиционная медицина использует его в качестве прекрасного антисептического, противовоспалительного и мочегонного средства.

Немного истории

Название этого растения solidago состоит из двух латинских слов. Это solidus, что означает «крепкий», и ago - «делать». В дословном переводе - «делающий здоровье».

И тут уже становится ясно, что имеет золотарник канадский лечебные свойства.
Растение было завезено в Европу из Северной Америки в качестве декоративного. После этого произошло его одичание и распространение на значительной территории.

В 1863 г. золотарник канадский был назван национальным растением Конфедерации в связи с наличием серого и желтого цветов. С 1895 г. он стал одним из официальных символов штата Небраска. С 1926 г. золотарник канадский - символ штата Кентукки.

В народе это растение называют золотушником и живительной травой, заячьим пухом и желтоцветом.

Классификация

Растение золотарник канадский является многолетним. Это один из множества (около 120) видов, относящихся к роду Золотарник. Принадлежит растение семейству Сложноцветных или Астровых.

Ботаническое описание

Что представляет собой золотарник канадский? Фото и описание, расположенные ниже, знакомят нас с этим многолетним травянистым растением.

Золотарник канадский достаточно высок. Его стебли достигают практически двухметровой высоты. При этом они ветвистые, прямостоящие, с большим количеством листьев по всей длине и одревесневающие у самого основания. Не удивительно, поддерживаются мощным корневищем.

Растение имеет поочередно размещенные заостренные ланцетные листья, на которых можно рассмотреть три жилки. Самые нижние зеленые пластины имеют пильчато-зубчатую форму. Эти листья отходят от стебля с помощью коротких черешков. Вверху расположены сидячие цельнокрайние листочки.

На втором году жизни, начиная с середины лета, растение начинает цвести. Это состояние продолжается в течение полутора-двух месяцев. Что при этом можно наблюдать? На самой верхушке стеблей начинают образовываться метельчатые соцветия-корзинки, которые состоят из мелких цветочков желтого окраса. 5-6 из них язычковые, а 6-8 - трубчатые. В них находится по пять тычинок с нижней завязью. К концу августа золотарник канадский начинает образовывать семянки-плоды цилиндрической формы. В них находятся мелкие семена с небольшим хохолком, имеющие

Растение является отличным медоносом. Его размножение происходит и с помощью ветра, и вегетативным способом (черенками или частью корневища).

В России можно встретить две разновидности золотарника - канадский и обыкновенный (золотая розга). Культивирование растения осуществляется с декоративной и лекарственной целью. При этом такой вид, как золотарник канадский, лечебные свойства проявляет более сильные, намного эффективнее воздействуя на организм больного.

Корневая система растения имеет способность к самостоятельному разрастанию. При этом золотарник канадский (фото смотрите ниже) постепенно вытесняет и заглушает огромное количество видов других растений.

Например, в Китае это считается серьезной сельскохозяйственной проблемой, требующей решения для сохранения посаженных на полях культур.

Распространение

Родом золотарник канадский из Северной Америки. На сегодняшний день территория его распространения достаточно обширна. Встретить растение можно на всей территории Европы. Огромные заросли золотарника встречаются также в Америке и в Азии. При этом выделяют дикорастущий и культурный виды.

Растение предпочитает легкие песчаные почвы, находящиеся на хорошо освещенных территориях. Часто золотарник канадский встречается на лесных опушках. Растет он и вдоль дорог, а также у домов в сельской местности. Садоводы считают его неприхотливым красивоцветущим растением.

Заготовка сырья

Золотарник канадский, лечебные свойства которого широко используются при лечении многих заболеваний, предварительно собирают для производства различных препаратов.

Лекарственным сырьем при этом служат стебли растения. В сфере гомеопатии для производства средств применяют его свежие цветки. Только в своей надземной части проявляет золотарник канадский лечебные свойства (фото ниже).

Заготовка целебной травы начинается в период ее цветения. При этом пригодными считаются только соцветия растения, а также его листья без жестких стеблей.
Корзинки цветков собирают лишь раскрывающиеся. Уже расцветшие после их срезки пушатся и выбрасывают семена.

Собранное сырье располагают под навесом, куда не попадают прямые солнечные лучи. Температура при этом не должна превышать 40 градусов. Стоит отметить, что жесткие верхушки стеблей заготовке не подлежат. Их просто выбрасывают.

Высушенные части растения упаковываются в бумажные мешки. Храниться сырье золотарника без потери своих лечебных свойств может не более двух лет.

Химический состав

Чем обусловлены лечебные свойства золотарника канадского? Его богатым химическим составом, в котором находится большое количество флаваноидов и дубильных веществ, алкалоидов и эфирных масел, хлорогеновой и кофейной кислоты, кумаринов и сапонинов, хлорофилла и дитерпенов, липофильных веществ и тритерпеновых соединений, а также смол.

Сочетание этих полезных элементов приводит к тому, что растение способно произвести лечебный эффект для устранения большого количества патологий, в связи с чем его использует не только народная, но и официальная медицина.

Фармакологические свойства

Какова польза золотарника канадского? Официальная медицина относит его к сильным диуретическим средствам. Это действие становится возможным благодаря входящим в его состав сапонинам. При этом рассматриваются помимо лечебных свойств золотарника канадского и противопоказания. Так, растение способно повысить pH мочи, в связи с чем препараты, в составе которых находится эта целебная трава, не рекомендуют пациентам при наличии у них фосфатных камней. Особую эффективность золотарник канадских проявляет в других случаях. Так, он показан при уратных и оксалатных камнях, мочекаменной болезни, а также патологиях почек и мочевого пузыря.

Флавоноиды, входящие в состав золотарника канадского, способны снизить проницаемость капилляров - мелких сосудов. Помимо этого растение проявляет свое антибактериальное и противовоспалительное действие на организм. Положительный эффект отмечен при его использовании для устранения молочницы (кандидоза), что объясняется губительным воздействием активных веществ целебной травы на дрожжевые патогенные грибки candida.

Область применения

Полезные свойства золотарника канадского позволяют применять его для лечения многих заболеваний. Ведь растение оказывает хорошо выраженное противовоспалительное и желчегонное, мочегонное и антибактериальное, вяжущее и отхаркивающее, обезболивающее и сахаропонижающее, общеукрепляющее и ранозаживляющее действие (ниже см. фото золотарника канадского).

Лечебные свойства растения, а именно его мощнейшее антибактериальное действие, позволяют делать его прекрасным дополнением в медикаментозной терапии такого заболевания, как туберкулез легких. Помимо этого целебная травка оказывает отхаркивающее и противокашлевое действие, помогая очистить легкие от находящейся в них мокроты, которая и провоцирует приступы кашля. Медики отмечают, что после включения растения в курс терапии, состояние пациента значительно улучшалось.

Растение оказывает неоценимую помощь и при лечении бронхита, а также бронхиальной астмы. Это происходит не только за счет противокашлевого, но и в связи с мощнейшим противовоспалительным, противогрибковым и антибактериальным действием.

Препараты, в составе которых находится золотарник канадский, помогают при воспалительных процессах в желчевыводящих протоках и в желчном пузыре, а также при застоях желчи. Болевые синдромы в таких случаях снимаются уже в первый день прохождения курса лечения.

Растение применяется для оказания мочегонного эффекта при необходимости удаления из почек песка, а также для снятия отеков. Причем препараты, содержащие золотарник канадский, улучшают состояние больного даже в тех случаях, когда у него наблюдаются отеки внутренних органов или даже мозга. Целебная трава активно выводит жидкость из организма в кратчайшие сроки, устраняя ее избыток.

Применяют золотарник канадский и при патологиях печени. В этом случае он также способен проявить выраженный лечебный эффект. При этом снимается воспаление, печень очищается от токсинов, запускаются процессы самовосстановления пораженных клеточек.

Помогает золотарник канадский от сахарного диабета. При этом он ускоряет обменные процессы. В свою очередь, это приводит к быстрому сжиганию сахара. Рекомендуется препараты с целебным растением принимать регулярно. Это позволит значительно понизить уровень сахара в организме. Такое свойство целебной травы используется не только при диабете. Препараты с ней рекомендуют принимать людям с повышенным сахаром.

Хорош золотарник канадский и при поносе. Он способен не только остановить неприятное явление, но и устранить саму причину болезни. Такое становится возможным благодаря тому, что патогенные микроорганизмы, которые, как правило, вызывают диарею, погибают при взаимодействии с веществами, входящими в состав целебной травы.

Используется золотарник канадский и как ранозаживляющее средство. Он предотвращает инфицирование и ускоряет процесс регенерации верхних слоев кожи. В тех случаях, когда требуется излечить язвы или гнойные раны, также не стоит забывать об этой удивительной травке. Она быстро очистит от гнойно-некротических выделений рану и в скором времени затянет ее.

Противопоказания

В каких случаях не применяется канадский золотарник? Противопоказания, запрещающие лечение препаратами, содержащими это растение, следующие:

Период беременности;
- возраст до 12 лет;
- период кормления грудью;
- аллергия;
- гломерулонефрит в острой форме.

Кроме этого стоит учесть, что растение является ядовитым. В связи с этим может нанести организму золотарник канадский вред. Чтобы этого не произошло, превышать допустимые дозировки при его использовании просто недопустимо.

Применение в официальной медицине

Лечебные свойства и противопоказания золотарника канадского хорошо известны фармакологам России, а также других стран. Они используют растение при создании некоторых комплексных препаратов, которые оказывают гипоазотемическое и диуретическое, антимикробное и противовоспалительное действие. Это, например, такие средства, как «Марелин» и «Простаном», «Фитозилин» и другие. Рассмотрим область их применения.

В составе препарата «Простанорм» находится жидкий экстракт, полученный из наземной части растения. Это фармакологическое средство успешно используют при терапии патологий предстательной железы (хронических и острых аденомах, простатитах). Препарат улучшает циркуляцию жидкости в простате, а также нормализует процесс диуреза. Его активные вещества воздействуют на стафилококки, энтерококки и стрептококки.

Противовоспалительный и смазмолитический препарат «Марелин» медики применяют при почечнокаменной болезни. В основе средства находится сухой экстракт золотарника, благодаря которому происходит отхождение конкрементов почек, усиливается диурез и устраняются почечные колики.

Препарат «Фитолизин» применяют при терапии воспалительных и инфекционных процессов, сопровождающих уролитиаз (мочекаменную болезнь). Средство способствует созданию бактериостатического, бактерицидного и спазмолитического эффекта.

На основе свежих соцветий золотарника канадского впускается гомеопатическое средство Sjlidago virgaurea. Его рекомендуют при воспалениях почек хронического характера, которые сопровождаются катарами, ревматическими спазмами и отеками.

Применение народными знахарями

Альтернативная медицина рекомендует применять золотарник канадский внутрь и наружно, используя при этом настойки и отвары. В первом случае растение показано при ревматизме, подагре, желчнокаменной болезни и при расстройствах желудка. Регулярное употребление внутрь отвара, изготовленного из этой целебной травы, позволяет вывести камни из почек и мочевыводящих путей. При этом человека перестают мучить спазматические почечные боли. Кроме того, отвары рекомендуют для лечения горла, для избавления от простудных инфекций, а также для устранения неприятного запаха из ротовой полости.

Такое же снадобье используется и наружно. Листья золотарника канадского отваривают для примочек при лечениях фурункулеза, порезов, плохо заживающих и гнойных ран. Есть и еще одно прекрасное наружное средство, позволяющее избавить человека от различных кожных заболеваний. Это измельченные сухие листья растения, смешанные со сливками.

Народная медицина использует и эфирное масло целебного растения. Причем оно может быть применено и как самостоятельное средство, и в комплексе с другими маслами, предназначенными для аромаламп, местных аппликаций, а также для массажных действий.

Медоносное растение

Каким образом еще может быть применен золотарник канадский? Растение отличает высокое содержание в его цветках нектара, который вырабатывается на протяжении всего светового дня. За весь период своего цветения, а это около двух месяцев, с одного гектара пчелы способны собрать до 100-150 кг меда. Этот продукт обладает терпким вкусом и горьковатым привкусом. Его цвет отличается темно-коричневым оттенком. Мед в своей жидкой консистенции хранится не более 1-2 месяцев. После этого происходит его кристаллизация.

Мед из золотарника канадского также использует народная медицина. Ведь этот продукт пчеловодства обладает множеством лечебных качеств, которые обусловлены наличием полезных веществ в самом растении. Кроме того, обработанный пчелами нектар становится еще более ценным. Золотарниковый мед обладает противомикробным и противовоспалительным действием. Его применение помогает бороться с почечными заболеваниями и с недугами мочевыводящих путей. Кроме того, этот ценный продукт пчеловодства оказывает помощь при дерматитах и экземах. Его применение позволяет укрепить иммунную систему, а также оказать положительное действие на обменные процессы.

Народные знахари рекомендуют такой мед не только перорально. Он может быть использован и в составе мазей и компрессов. Такое его применение позволяет излечить экземы, отеки, дерматозы, длительно заживающие раны, а также кожные раздражения.

Свое благотворное влияние мед оказывает и на пищеварительную, сердечную и нервную систему. Этот продукт считается также великолепным средством для исцеления ангины, менингита, ринита и гайморита.

доктор сельскохозяйственных наук, профессор каф. ботаники РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева

В медицине используются в основном 2 вида – золотарник канадский и широко произрастающая в нашей стране по полям-лугам золотая розга.

Или золотая розга (Solidago virgaurea ) - многолетнее травянистое растение из семейства астровые с коротким деревянистым корневищем. Стебли прямостоячие, чаще неветвящиеся, олиственные, до 100 см высотой. Листья очередные или яйцевидные, заостренные, по краю пильчатые, прикорневые и нижние стеблевые листья сужены в крылатый черешок, верхние более мелкие, сидячие. Цветки желтые, в мелких (до 15 мм) корзинках, собранных в кистевидное или метельчатое соцветие. Плоды - цилиндрические ребристые семянки с буроватым хохолком. Цветет в августе – сентябре.

Встречается по всей европейской части России, кроме Крайнего Севера, на Кавказе и Западной Сибири. Растет в светлых лесах, по опушкам, полянам, вырубкам, среди кустарников, на лугах. Предпочитает не тяжелые по механическому составу почвы. В Восточной Сибири и на Дальнем Востоке замещается близкими видами – золотарником даурским (Solidago dahurica син. Solidago virgaurea var. dahurica) и золотарником низбегающим (Solidago decurrens), которые могут использоваться в медицине благодаря схожему химическому составу наравне с основным видом.

Применяется верхняя часть олиственных побегов, заготовленная во время цветения. Золотарник совершенно не обязательно выращивать на участке, можно просто в конце июля-начале августа собрать и высушить верхние части побегов с соцветиями. Сушат в тени, раскладывая на чердаках или в сушилке, при температуре не выше +35+40 о С. Гомеопаты используют соцветия.

У нас используется в народной медицине и заготавливается дикорастущий. Входит в Фармакопею Германии и некоторых других стран.

Свойства и применение золотарника обыкновенного

Химический состав: органические кислоты, дитерпеноиды, 2,4% сапонинов,фенольные соединения, фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейная, хлорогеновая, гидроксикоричная), до 012% флавоноидов (рутин, кверцетин и др.), кумарины, эфирное масло.

Фармакологическое действие. Обладает сильным мочегонным действием, применяется при заболеваниях почек и мочевого пузыря, особенно часто - при мочекаменной болезни. При этом, наряду с мочегонным действием, проявляет противовоспалительные и сильнейшие антибактериальные свойства. Содержащиеся флавоноиды снижают проницаемость капилляров. Эффективен при уратных и оксалатных камнях. Противопоказан при фосфатных камнях, так как повышает рН мочи. Очень эффективен при хроническом простатите, цистите и уретрите. Иногда в сборах применяется при импотенции и аденоме простаты. Благодаря антифунгиальному действию, эффективен против кандидозов, а в просторечии - молочницы.

В народной медицине используют при желчнокаменной болезни, расстройствах желудка, при ревматизме, подагре, связанных с нарушением обмена мочевой кислоты. Наружно свежие листья используют при нарывах и фурункулах. В Германии иногда применяют при заболеваниях вен, что, вероятно, связано с высоким содержанием флавоноидов и ярко выраженным противовоспалительным, сосудоукрепляющим и антиоксидантным действием.

(Solidago canadensis L.) очень декоративен, выведены многочисленные садовые формы, которые заметно отличаются по высоте и форме соцветий. Этот вид - многолетнее травянистое растение высотой до 150 см, сильно напоминающее золотарник обыкновенный. Стебли прямостоячие, разветвляющиеся в верхней части, по всей длине густо облиственные, деревянистые у основания. Окраска стеблей от темно- до светло-зеленой. Листья очередные, линейно-ланцетные, на верхушке длинно-заостренные с хорошо заметными тремя жилками. Нижние листья по краям остропильчато-зубчатые, короткочерешковые, длиной 5-12 см. Верхние листья цельнокрайние, сидячие, в длину 4-8 см. Цветочные корзинки мелкие, диаметром 3-5 мм, состоят из 4-6 язычковых и 5-8 трубчатых цветков. Язычковые цветки желтого цвета, расположены в один ряд. Трубчатые находятся в центре корзинки, имеют 5 тычинок и пестик с плоским двураздельным рыльцем. Плод - узкоцилиндрическая ребристая семянка длиной 4-15 мм. Цветет со второго года жизни в конце июля-начале августа, плодоносит в конце августа-начале сентября.

Родина этого вида - Северная Америка. Встречается в США в горах до субальпийской зоны. В Европе сначала использовался как декоративное, после - и как лекарственное растение. Одичал и в настоящее время широко распространен по всем западным и центральным районам Европейской части страны.

Золотарник канадский - неприхотливое растение, нетребовательное к почвенным условиям. Переносит частичное затенение, но лучше развивается на солнечных участках. Растение очень крупное и мощное, исходя из этого следует выбирать просторное место для его посадки. Размещать растения можно в миксбордере и располагать с учетом высоты выбранного сорта или формы. В качестве сухоцвета срезанные в самом начале цветения верхние части побегов оживят своей яркой окраской любой зимний букет.

Выращивание и размножение

Выращивание растения не представляет трудностей. Золотарник легко размножается семенами и вегетативно, отрезками корневищ и зелеными черенками. Семена можно посеять без предварительной подготовки ранней весной. Потом растения лучше или проредить, или рассадить на расстоянии 20-30 см друг от друга. Осенью лучше срезать надземную часть на высоте 5-6 см от поверхности почвы.

Размножение вегетативное – отрезками корневищ, возможно - зеленым черенкованием. Черенки укореняются в условиях искусственного тумана, и даже без него, без особых сложностей. Оптимальная схема посадки 20-30х70 см.

Растение очень отзывчиво на минеральные и органические удобрения, которые, учитывая длительный срок произрастания на одном месте, имеет смысл внести при посадке.

Вредителями и болезнями растение практически не поражается.

Свойства и применение золотарника канадского

В качестве лекарственного сырья, так же, как у золотарника обыкновенного, применяется верхняя часть облиственных побегов, заготовленная в самом начале цветения. Срезают верхушки 30-40 см. Эксплуатировать плантацию можно 5 и более лет. Если запоздать с уборкой сырья, то соцветия сильно пушатся при сушке. В отличие от золотой розги, у золотарника канадскго после сушки удаляют грубые стебли, оставляя листья и соцветия. Сушат сырье в тени, раскладывая на чердаках или в сушилке при температуре не выше +35+40 о С.

Химический состав. Надземная часть растения содержит органические кислоты, дитерпеноиды, 2,4% сапонинов, фенольные соединения, фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейную, хлорогеновую, гидроксикоричную), до 0,12% флавоноидов (рутин, кверцетин и др.), кумарины, эфирное масло, аминокислоты, хлорофилл, сахара, липофильные вещества, дитерпены, большое количество тритерпеновых сапонинов. По нормативным документам, сумма флавоноидов в пересчете на рутин должна быть не менее 3%.

Фармакологическое действие. Растение обладает сильным мочегонным действием, применяется при заболеваниях почек и мочевого пузыря, особенно часто при мочекаменной болезни. Эффективен при уратных и оксалатных камнях. Противопоказан при фосфатных, так как повышает рН мочи. При этом, наряду с мочегонным действием, проявляет противовоспалительное и сильнейшее антибактериальное. Очень эффективен при хроническом простатите, цистите и уретрите. Иногда в сборах применяется при импотенции и аденоме простаты. Золотарник канадский входит в состав польского Фитолизина и украинского Марелина. В ВИЛАРе разработан комплексный препарат Простанорм, применяемый при острых и хронических простатитах и аденоме простаты, в который, кроме золотарника канадского, входят эхинацея и солодка.

В народной медицине используют при желчнокаменной болезни, расстройствах желудка, при ревматизме, подагре, связанных с нарушением обмена мочевой кислоты. Наружно свежие листья используют при нарывах и фурункулах. В Германии иногда применяют при заболеваниях вен.

В связи с некоторой токсичностью золотарника обыкновенного, необходимо соблюдать дозировку . Золотарник канадский практически не токсичен.

Настой травы : 20 г сырья на 200 мл кипятка настоять, процедить и принимать после еды по 1/3-1/4 стакана 3 раза в день.

Холодный настой травы : 6 чайных ложек сырья залить 400 мл кипяченой воды и настаивать 8 часов, процедить, выпить в течение дня.

Благодаря высокому содержанию флавоноидов, надземная часть обоих видов золотарника может быть использована для окраски ткани в жёлтый цвет (речь идёт о натуральных волокнах - шерсть, шёлк, и несколько хуже - хлопок).

В последние годы ученые обнаружили сильное аллелопатическое влияние золотарника на микрофлору почвы. Растения выделяют в почву большое количество вторичных метаболитов, которые подавляют развитие живущих в почве вредоносных фитопатогенов и очищают таким образом почву.

Были получены интересные результаты, что отвар двух видов растений - золотарника канадского (лист) и гвоздики подавляет развитие комаров рода Аедес (Аedes aegypti ), который является переносчиком возбудителей желтой лихорадки, лихорадки денге, вухерериоза. Так что изгнанием солей из организма польза золотарника не ограничивается.

Фото: Елена Маланкина, Максим Минин, Рита Бриллиантова

«Фармакогностическое изучение золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.) ...»

-- [ Страница 1 ] --

Пятигорский медико-фармацевтический институт –

филиал государственного бюджетного образовательного учреждения высшего

профессионального образования «Волгоградский государственный

медицинский университет» Министерства здравоохранения

Российской Федерации

На правах рукописи

ФЕДОТОВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА

Фармакогностическое изучение

золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.)

14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ

КОНОВАЛОВ Д.А.

ДОКТОР ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК,

ПРОФЕССОР

ПЯТИГОРСК – 2014 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ РОДА

ЗОЛОТАРНИК

1.1 История и распространение видов рода Золотарник

1.3 Систематическое положение рода Золотарник

1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник

1.5 Использование сырья видов рода Золотарник

Выводы по обзору литературы

2.1 Объекты исследования

2.2 Методы исследования

2.2.1 Химические реакции

2.2.2 Хроматографические методы исследования

2.2.3 Спектральные методы

2.2.4 Титриметрические методы

2.2.5 Гравиметрические методы

2.2.6 Ресурсоведческие исследования

2.2.7 Фармакологические методы исследования

2.2.8 Отбор проб для анализа

2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья

2.2.10 Определение числовых показателей

2.2.11 Валидация методики количественного определения

2.2.12 Микробиологическая чистота

2.2.13 Определение сроков годности

2.2.14 Методы статистической обработки

ГЛАВА 3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РЕСУРСОВЕДЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО И ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ

ВВЕДЕНИЯ ЕГО В КУЛЬТУРУ

3.2 Расчет объема ежегодных заготовок

3.3 Исследования по введению золотарника кавказского в культуру................. 41 Выводы по главе

ГЛАВА 4 МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И АНАТОМО–ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ

ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА

КАВКАЗСКОГО

4.1 Морфологическая характеристика «Золотарника кавказского травы»......... 46

4.2 Анатомическое строение листа

4.2.1 Строение листа с поверхности

4.2.2 Строение листа на поперечном срезе

4.3 Анатомическое строение стебля

4.3.1 Строение стебля с поверхности

4.3.2 Строение стебля на поперечном срезе

4.3.3 Строение стебля на продольном срезе

4.4 Анатомическое строение цветка

4.5 Микроскопический анализ измельченной «Золотарника кавказского травы»

4.6 Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы»...... 66

4.7 Морфологическая характеристика корневищ с корнями золотарника кавказского

4.8 Анатомическое строение корневищ с корнями золотарника кавказского.... 69 Выводы по главе

КАЧЕСТВА ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ

5.1 Анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского с помощью качественных реакций

5.2 Изучение фенольных соединений травы золотарника кавказского методом БХ

5.3 Обнаружение рутина методом ТСХ в «Золотарника кавказского траве»..... 78

5.4 Изучение фенольных соединений золотарника кавказского травы методом ВЭЖХ

5.5 Количественное определение флавоноидов в пересчете на рутин в «Золотарника кавказского траве» методом дифференциальной спектрофотометрии

5.6 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского методом спектрофотомерии в пересчете на кофейную кислоту

5.7 Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского

5.8 Изучение тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского........ 95

5.9 Изучение полиацетиленовых соединений корневищ с корнями золотарника кавказского

5.10 Количественное определение органических кислот в траве золотарника кавказского

5.11 Изучение органических кислот травы золотарника кавказского методом ВЭЖХ

5.12 Изучение углеводов травы золотарника кавказского

5.13 Биологически активные соединения травы золотарника кавказского, идентифицированные методом ГЖХ–МС

5.14 Изучение аминокислотного состава травы золотарника кавказского....... 112

5.15 Изучение минерального состава травы золотарника кавказского............. 113

5.16 Определение некоторых числовых показателей травы и корневищ с корнями золотарника кавказского

5.17 Микробиологическая чистота «Золотарника кавказского травы»............ 117

5.18 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы»............ 118 Выводы по главе

ГЛАВА 6 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ПО РАЗРАБОТКЕ «ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ ЭКСТРАКТА

СУХОГО», СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПОЛУЧЕННОГО ЭКСТРАКТА И

ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ

АКТИВНОСТИ

6.1 Получение «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»................. 121

6.2 Разработка методик стандартизации «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.2.1 Общие показатели

6.2.2 Изучение фенольных соединений

6.2.3 Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин методом дифференциальной спектрофотометрии

6.2.4 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту методом спектрофометрии

6.3 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.4 Предварительное изучение фармакологической активности

6.4.1 Определение «острой» токсичности «Золотарника кавказского травы». 133 6.4.2 Патоморфологические изменения в органах, вызванные введением извлечения из травы золотарника кавказского в дозе 10000 мг/кг

6.4.3 Изучение диуретической активности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.4.4 Изучение антибактериального действия «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

Выводы по главе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БАС – биологически активные соединения БХ – бумажная хроматография ВРПС – водорастворимые полисахариды ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография ГЖХ – газо-жидкостная хроматография ГЖХ-МС – газожидкостная хромато-масс-спектрометрия ГМЦ – гемицеллюлозы ЛД – летальная доза ЛРС – лекарственное растительное сырье ПВ – пектиновые вещества ПС – полисахариды СО – стандартный образец СРС – спирторастворимые сахара ТСХ – хроматография в тонком слое сорбента ФСП – фармакопейная статья предприятия Ara – арабиноза Gal – галактоза Glс – глюкоза Rha – рамноза UAc – уроновые кислоты Xyl – ксилоза

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования Заболевания мочеполовой сферы в мире по данным Всемирной организации здравоохранения находятся на одном из лидирующих мест в общей структуре заболеваемости населения. На сегодняшний день среди мужчин старше 60 лет в 90% случаях диагностируются заболеваниями почек, мочевого пузыря и предстательной железы. У женщин старше 50 лет уролитиаз, цистит и т.п. отмечается в 70% случаев . Синтетические препараты успешно используются в качестве основных средств при фармакотерапии и профилактике заболеваний почек. Но, несмотря на высокую эффективность, они оказывают и неблагоприятное воздействие на функциональное состояние организма. Биологически активные соединения лекарственных растений обладают широким спектром действия, низкой токсичностью, что позволяет их рекомендовать для длительной терапии. Однако, выбор растительных лекарственных препаратов, оказывающих комплексное нефропротекторное воздействие, ограничен.

Перспективным источником с точки зрения получения нового вида лекарственного растительного сырья (ЛРС) является ранее неизученный представитель флоры Кавказа – золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.-Nath.).

Лекарственные средства на основе некоторых видов рода золотарник широко используются в мировой медицинской практике. Так, экстракт травы золотарника канадского входит в препарат «Марелин» (Украина), применяемый в качестве спазмолитического, диуретического и противовоспалительного средства при лечении и профилактике оксалатного и уратного уролитиаза, а также в состав препарата «Простанорм» (Россия), рекомендуемого при простатите. Экстракт травы золотарника обыкновенного входит в состав препарата «Фитодолор» (Германия), противовоспалительная активность которого сопоставима с таковой индометацина. Подземная часть этого вида золотарника входит в состав БАД «Мен"с формула Простата форте», а также используется в народной медицине Кавказа в качестве ранозаживляющего средства .

В связи с этим изучение золотарника кавказского мы посчитали целесообразным.

Степень разработанности темы Золотарник кавказский является неизученным научной медициной представителем флоры Северного Кавказа.

Цель и задачи исследования Целью работы являлось фармакогностическое изучение золотарника кавказского и научное обоснование возможности использования его в качестве источника сырья для получения лекарственных средств, оказывающих влияние на мочевыделительную систему.

Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

Изучить данные научной литературы по распространению, фитохимическому и фармакологическому изучению представителей рода Solidago.

Оценить ресурсные характеристики золотарника кавказского в некоторых районах Северного Кавказа и исследовать возможность его культивирования.

Определить морфолого-анатомические признаки травы и корневищ 3.

с корнями золотарника кавказского.

Исследовать качественный состав и количественное содержание основных групп биологически активных соединений (БАС) травы и корневищ с корнями золотарника кавказского.

Провести предварительное изучение «острой» токсичности, диуретической и антибактериальной активности травы и сухого экстракта золотарника кавказского.

Разработать проект фармакопейной статьи предприятия на «Золотарника кавказского траву».

Научная новизна

В результате проведенных исследований нами впервые:

определены ресурсы золотарника кавказского в отдельных районах его произрастания на Северном Кавказе и изучена возможность его культивирования;

предложены морфологические и анатомо–диагностические признаки, позволяющие установить подлинность травы и корневищ с корнями золотарника кавказского;

методом ВЭЖХ установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся 24 фенольных соединения, из которых идентифицированы флавоноиды (рутин, виценин, гесперидин), кумарины (умбеллиферон, эскулетин, дигидрокумарин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная);

в составе органических кислот в траве золотарника кавказского методом ВЭЖХ идентифицированы лимонная, яблочная и янтарная;

изучены углеводы травы золотарника кавказского, основными по содержанию являются фракции пектиновых веществ (ПВ) и гемицеллюлоз (ГМЦ);

установлено, что трава золотарника кавказского содержит тритерпеновые гликозиды – производные олеаноловой кислоты;

методом ГЖХ–МС в траве золотарника кавказского обнаружены жирные кислоты (дигидроксипропионовая, тригидроксимасляная, гидроксимасляная, пальмитиновая, линолевая, линоленовая, стеариновая кислоты), многоатомные спирты и их производные (глицерин, ксилит, рибит, инозит, мио–инозит, сцило–инозит, глюцитол) и др.;

методом жидкостной хроматографии на автоматическом аминокислотном анализаторе в траве золотарника кавказского впервые обнаружены 15 аминокислот, из которых 9 являются незаменимыми;

установлено, что трава золотарника кавказского содержит 5 макроэлементов и 16 микроэлементов. Из них эссенциальными являются 11 элементов, условно–эссенциальными – 6 и условно–токсичными – 4 элемента;

установлено количественное содержание суммы флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, органических кислот, тритерпеновых гликозидов, дубильных веществ в траве и фенолкарбоновых кислот и дубильных веществ в корневищах с корнями золотарника кавказского;

методом ВЭЖХ в сухом экстракте золотарника кавказского установлено содержание 18 соединений, из которых идентифицированы рутин, лютеолин–7–гликозид, умбеллиферон, виценин, эскулетин, гесперидин, галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная кислоты;

в сухом экстракте золотарника кавказского методом ВЭЖХ выявлено наличие лимонной, яблочной и янтарной кислот, среди которых по содержанию преобладает лимонная кислота;

установлено содержание суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в сухом экстракте золотарника кавказского;

изучена токсичность «Золотарника кавказского травы», определена диуретическая и антимикробная активность, полученного из нее экстракта.

Теоретическая и практическая значимость работы Изучена возможность использования нового вида отечественного сырья – «Золотарника кавказского травы» для получения суммарного препарата («Золотарника кавказского травы экстракта сухого»), обладающего диуретической и антимикробной активностью.

Разработаны методы качественного и количественного анализа травы золотарника кавказского, основанные на обнаружении фенольных соединений, тритерпеновых гликозидов, органических кислот и полисахаридов. Разработана технологическая схема производства сухого экстракта травы золотарника кавказского. Разработаны нормы, позволяющие стандартизовать траву золотарника кавказского и сухой экстракт из нее с учетом современных требований, предъявляемых к качеству ЛРС и извлечений на его основе.

Методология и методы исследования В работе были использованы методы позволившие провести комплексные фармакогностические (макро– и микроскопические, фитохимические, товароведческие и ресурсоведческие) исследования. В рамках отдельных технологических и фармакологических экспериментов с использованием соответствующих методов исследования были получены предварительные данные, позволившие обосновать возможные направления использования нового вида ЛРС. Фитохимические исследования проводились с использованием бумажной, тонкослойной, газожидкостной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, газожидостной хромато–масс–спектрометрии, спектрофотометрии в УФ–, видимой и ИК– областях.

Положения, выносимые на защиту :

результаты ресурсоведческих и интродукционных исследований золотарника кавказского;

результаты морфолого-анатомического изучения травы и корневищ с корями золотарника кавказского;

результаты фитохимического изучения основных групп БАС в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского;

методики стандартизации «Золотарника кавказского травы» и сухого экстракта на ее основе;

результаты предварительных фармакологических исследований.

Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность полученных результатов определяется объемностью изученной информационной базы и обширностью исследования, использованием различных современных физико–химических методов анализа, математико–статистической обработкой полученных данных.

Основные положения диссертационной работы представлены на Международной научной конференции «Рациональное использование природных биологических ресурсов» (Рим–Флоренция, 2013); на II Международной научно– практической конференции «Кластерные подходы фармацевтического союза:

образование, наука и бизнес» (Белгород, 2012); на XХ Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2013); на региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2012, 2013, 2014); на научно-практической конференции молодых ученых и студентов ВолгГМУ "Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины" (Пятигорск, 2014); на региональном подготовительном этапе Конкурса молодежных проектов Всекавказского молодежного Форума «Машук–2013» (Пятигорск, 2013); на Северо–Кавказском молодежном Форуме «Машук–2013» (Пятигорск, 2013). По материалам диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 7 статей – в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Личный вклад автора Автор участвовал во всех этапах экспериментальных работ, в получении исходных данных, их обработке и интерпретации, оформлении диссертационной работы. Автором проведен фитохимический анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского, исследованы ресурсы травы и изучена возможность введения в культуру золотарника кавказского, установлены морфологические и анатомо-диагностические признаки сырья, проведены предварительные фармакологические исследования экстракта из травы золотарника кавказского.

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 163 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, списка цитируемой литературы, включающего 163 источника, из которых 86 на иностранном языке, и приложения. Диссертация иллюстрирована 53 рисунками и 35 таблицами.

ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ

РОДА ЗОЛОТАРНИК

1.1 История и распространение видов рода Золотарник Золотарник (Solidago L.) известен еще с библейских времен, по одной из версий он является жезлом Аарона. Когда израильтяне возроптали на первосвященника Аарона, Моисей, по повелению Божию, приказал начальникам колен принести свои жезлы. На них Моисей написал имена тех, кому они принадлежали. Все жезлы были положены в скинии собрания перед ковчегом. Оказалось, что только жезл Аарона чудесным образом расцвел за одну ночь, знаменуя этим избранность сословия священников (Библия, чис. 9:4).

Русское название золотарник происходит от слова золото. Оно дано по золотисто–желтым цветкам растения. Название золотая розга дано по форме стебля и цветка. Стебель у этого растения прямой, желобчатый и похож на хлыст.

Родовое название Solidago L. происходит от латинского solidus – крепкий, здоровый и agree – делающий. Французское название Verge d’or происходит от двух слов verge – розга (хлыст) и or – золото. Английское название Goldenrod имеет следующее происхождение: golden – золото и rod – розга.

В словаре Н.И. Анненкова для золотарника обыкновенного (Solidago virgaurea L.) приводится более 50 синонимов, благодаря тому, что он в каждой российской губернии имел свое толкование и название: блошник, полетуха (Могил.), винокур (Нижег.), воронец, заячьи уши (Костр.), зверобой (Моск.), желтый цвет, золотое перо (Тверск.), живительная трава (Перм.), краснуха (Пск.), боровой пуховик (Влад.), перестрел, табака лесная (Гродн.), дикая цыкорiя (Минск.), жовтобрюх (Киев.), nawloc glowienki czerwone (Пол.), woolmete rohi (Эст.), keltainenkukka (Фин.) .

В Канаде, США и Мексике золотарник широко распространен как дикорастущее растение, в Европе – как возделываемое декоративное и одичалое . Впервые как декоративное интродуцированное растение золотарник зарегистрирован в Ботаническом саду Лондона в 1758 г. . Вскоре он был отмечен в садах и питомниках континентальной Европы . Золотарник стал инвазионным через 100 лет ввиду высокого уровня изменчивости морфолгических признаков . В настоящее время ареал рода в Европе простирается от 42 до 63° с. ш. и ожидается дальнейшее расширение его границ в восточном направлении .

Помимо Европы золотарник также натурализовался в Японии, Корее и на Дальнем Востоке РФ , в Новой Зеландии, Австралии, на Азорских и на Гавайских островах, а также в Мексике .

В СССР золотарник канадский был впервые введен в культуру в 1986 году на Украине c целью получения лекарственного растительного сырья для производства препарата Марелин. После распада СССР культура золотарника канадского была апробирована в России в условиях Ставропольской возвышенности , нечерноземной зоне и Московской области .

Распространение видов рода Золотарник во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) по данным Черепанова С.К. представлено в таблице 1.1.

Золотарник требователен к свету , однако обнаруживается и в тени . Чаще встречается на участках богатых азотом, предпочитает климат с умеренными летними и зимними температурами , обладает широкой устойчивостью к влажности почвы .

Виды рода Золотарник являются корневищными гемикриптофитами и имеют сложный жизненный цикл с поколениями корневищ и семян. Образование семян, новых побегов и корневищ происходит каждый год, а все надземные побеги отмирают в осенний период . В менее благоприятных условиях и под воздействием часто повторяющихся повреждающих факторов образуется больше легких семян, что гарантирует рассеивание на дальние расстояния .

–  –  –

Таким образом, во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) встречаются 26 видов рода Золотарник.

1.2 Ботаническая характеристика видов рода Золотарник

–  –  –

Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.–Nath.) – многолетнее травянистое растение со стеблями, немного приподнимающимися при основании или прямостоячими, высотой 30-70 см, у основания слегка или полностью окрашены антоцианом в красный цвет.

Листья яйцевидно–продолговатые, продолговато–ланцетные или ланцетные, пильчатые, суженые в окрыленный черешок, короче листовой пластинки.

Самые верхние листья нередко сидячие.

Соцветие колосовидное, сжатое, плотное или рыхловатое, обычно прерванное. Ножки цветочных корзинок без прицветников или с немногочисленными прицветниками, чаще сильно опушенные.

Корзинки крупные, высотой 1-1,5 см, 1,5-2 см в диаметре. Обвертка конически–колокольчатая. Листочки корзинки рыхло расположенные, немногорядные, наружные ланцетные в 1,5-2 раза короче узколинейных внутренних, те и другие слегка опушенные, острые. Язычки краевых цветков узкопродолговатые, равные по длине обвертке или слегка короче ее. Цветки мелкие желтые, плод семянка .

Отличительными морфологическими признаками являются 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, ножки корзинок обычно без прицветников .

–  –  –

1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник S. virgaurea L. – з. обыкновенный

Полифенолы:

Флавоноиды: рутин, кверцетин, кверцитрин, астрагалин , изокверцитрин, рамноглюкозид кемпферола , кемпферол, изорамнетин, нарциссин, глюкорамнозид рамнетина , никотифлорин, афзелин (3–рамнозид кемпферола) , кверцетин–D–глюкозид, кемпферол–D–глюкозид, кемпферол–3–О–рутинозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая , кофейная, изохлорогеновая гидроксикоричная, хинная Фенольные соединения: лейокарпозид , виргауреозид А Кумарины: эскулетин, эскулин Дубильные вещества Антоцианы: 3–гентиобиозид цианидина Сапонины: виргауреасапонины (виргауреасапонин–3 ), в гидролизате виргауреагенин А , виргауреагенин В (олеаноловая кислота), виргауреагенины С, D, Е, виргауреагенины G (полигаловая кислота), Н , солидагосапонин 21 – 30 (рисунок 1.

2) , байогенин Дитерпеноиды Тритерпеноиды Полиацетиленовые соединения: 2,8–цис–цис–матрикариаэфир, матрикариа–лактон, лахнофиллумлактон Бром 0,055% Углеводы: полисахариды 3-8%, в гидролизате галактуроновая кислота, галактоза, глюкоза, арабиноза, ксилоза, рамноза Фитоэкдизоны Жирное масло 14,4% Каучук Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен, –элемен, гермакрен В, гермакрен D, –кадиен, –пинен, –мирцен Солидагосапонин 21 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 26 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 22 R1=Xyl; R2=H; R3=A; R4=H Солидагосапонин 27 R1=H; R2= Glc; R3=H; R4=H Солидагосапонин 23 R1=Xyl; R2=H; R3=Api–Ac; R4=A Солидагосапонин 28 R1=Glc; R2=H; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 24 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=B Солидагосапонин 29 R1=H; R2= Glc; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 25 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=H Солидагосапонин 30 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=H

Рисунок 1.2 – Солидагосапонины

Solidago canadensis L. – золотарник канадский

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол, кверцетин, изорамнетин, астрагалин, кемпферол–3–О–глюкорамнозид, кверцетин–3–О–глюкопиранозид, рутин, кверцетин– 3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–рутинозид (нарциссин), рамнетин–3–О–глюкорамнозид, изорамнетин–3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид Фенолкарбоновые кислоты: кофейная кислота Кумарины: скополетин, умбеллиферон Тритерпеновые сапонины: гликозиды олеаноловой кислоты, канаденсисапонины 1 – 8, 3–(3R–ацетоксигексадеканоилокси)–люп–20(29)–ен, 3–(3– кетогексадеканоилокси)–люп–20(29)– ен, 3–(3R–ацетоксигекса-деканоилокси)–29–нор–люпан–20–он,3–(3–гетогексадеканоилокси)– 29– нор–люпан– 20–он , байогенинсапонины 1 – 4 Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен,–элемен, гермакрен В, гермакрен D , –пинен, –мирцен , 3–эпи––кубебен, 3–эпи–– кубебен Полиацетиленовые соединения: матрикариаэфир, клеродан, колавеноловая кислота Аминокислоты, горечи, полисахариды S. gigantea Ait. – з. гигантский

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид, кемпферол Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая Компоненты эфирного масла: –пинен, –мирцен , эпи–ториленол, 1,10–секо–эудесма–4(15), 5(10)–диен–1–aл, цис–эудесм–4(10)– ен–1–oн Сапонины: гигантеасапонины 1 – 6 S. virgaurea var. gigantean

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид Тритерпеноиды: эритродиол–3–ацетат , –амирина ацетат Витамины: –токоферол–квинон Производное изопрена: транс–фитол Компоненты эфирного масла: –диктиоптерол

–  –  –

S. decurrens Lour. – з. низбегающий

Полифенолы:

Фенолкарбоновые кислоты: кофейная, хлорогеновая Фенольные соединения: лейокарпозид Ароматические соединения: 5–бензилметоксибензоат, 3–метокси–4– ацетоксициннамоилангелат, 3,5–диметокси–4–ацетосициннамоилангелат, 2– метоксибензил–2,3,6–триметоксибензоат, 2–метоксибензил–2,6– диметоксибензоат, бензил–2–гидрокси–6–метоксибензоат, метил (2E,8Z)– декадиен–4,6–диноат, бензил–2,6–диметоксибензоат, метил (2Z,8Z)–декадиен– 4,6–диноат Антоцианы: цианидин–3–глюкозил–гликозид Стероиды: ситостерин Тритерпеновые сапонины: Полиацетиленовые соединения

–  –  –

S. rugosa Mill. – з. морщинистый Дитерпеноиды: (+)–18–тиглоксиманнол, 18–гидроябиета–7,13(14)–диен, 18–тиглоксиябиета–7,13(14)–диен, 7–гидро–13,15–дигидроксиябиета–8 (14)– ен–18–оик кислота, 15–гидройдегидроабиетик кислота S. altissima L. – з. высочайший

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–O–рутинозид–7–O––D–апиофуранозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая кислота, кофейная кислота и ее производные) Фенольные гликозиды: транс–тилирозид Ацетиленовые соединения и терпеноиды: дегидроматрикариалактон, Е,7–ацетоксилколавеновая кислота (солидагоновая кислота), колавенол .

1.5 Использование сырья видов рода Золотарник

Применение золотарника в народной медицине В народной медицине настой и отвар травы золотарника обыкновенного используется как диуретическое, антисептическое, противовоспалительное средство при болезнях почек и мочевого пузыря (мочекаменная болезнь, холецистит, язвенный цистит, энурез), гипертрофии предстательной железы. Однако, сфера применения золотарника намного шире. Он оказывает вяжущее, потогонное, отхаркивающее, гемостатическое действие, применяется при желчнокаменной болезни, сахарном диабете, бронхиальной астме, туберкулезе легких, острых респираторных инфекциях, остром ларингите, ангине, коклюше, подагре, артритах, энтерите, колите, меноррагии, белях, экземе, асците. В Молдавии, Белоруссии соцветия используют наружно в смеси со сливками, свиным жиром или сливочным маслом при туберкулезе кожи, дерматитах, ожогах, ревматизме.

В Коми АССР, на Кавказе, в Сибири – при скрофулезе. В китайской народной медицине семена золотарника обыкновенного применяют для разжижения крови и устранения вздутия кишечника, а также при нарушениях менструального цикла, холере, диарее, появлении крови в моче у детей. На Кавказе настойки подземной части золотарника применяются в качестве ранозаживляющего средства .

Применение золотарника в научной медицине Золотарник обыкновенный, з. канадский и з. гигантский включены в Европейскую фармакопею , з. канадский и з. гигантский – в Британскую травяную фармакопею . В СССР была разработана ФС «Трава золотарника канадского» .

Для видов рода Золотарник установлен целый спектр фармакологической активности.

Мочегонная активность Флавоноидная фракция золотарника обыкновенного в дозе 25 мг/кг показывала увеличение диуреза у крыс на 88% через 24 ч по сравнению с контрольным образцом (NaCl, 5 мл, пероральное введение), при этом наблюдалось снижение ночной экскреции калия и натрия и увеличение экскреции кальция.

Значительное увеличение диуреза у крыс с повышенным выведением натрия, калия и хлорид–ионов наблюдалось после приема внутрь золотарника обыкновенного (0,3% флавоноидов, 4,64 мл / кг и 10,0 мл / кг). Причем низкая доза оказалась более эффективной .

Противовоспалительная активность Противовоспалительная активность сапонинов золотарника обыкновенного была испытана на модели отека у крыс. В результате наблюдалось значительное снижение отека после внутривенного введения 1,25-2,5 мг/кг комплекса тритерпеновых сапонинов .

Лабдановые дитерпены, выделенные из золотарника чилийского, при хлоровородно–этанольно индуцированных поражениях желудка у мышей проявили гастропротектиновую активность .

Дитерпен солидагогенон, содержащийся в водном экстракте из соцветий золотарника чилийского, также проявил гастропротективную активность .

На крысах был протестирован препарат Phytodolor на противовоспалительную, обезболивающую и жаропонижающую активность. Активность была такой же, как и у стандартных образцов салицилового спирта и индометацина .

Сапонины, флавоноиды и кофейная кислота, выделенные из золотарника обыкновенного ингибировали активность лейкоцитарной эластазы и протеазы, участвующих в прогрессировании воспаления. Сапонины стимулировали синтез и высвобождение глюкокортикоидов в надпочечниках .

Водный экстракт золотарника обыкновенного значительно подавлял воспалительную реакцию на коже морских свинок, индуцированную рентгеновским излучением .

46% водно–спиртовый экстракт золотарника чилийского оказывал противовоспалительную активность за счет ингибирования дигидрофолат редуктазы.

Лейокарпозид, выделенный из золотарника чилийского, оказывал противовоспалительный и болеутоляющий эффект .

Выделенная из золотарника гигантского 3,5–ди–О–кофейная кислота обладала противовоспалительными свойствами, не имея побочных эффектов, и поэтому исследовалась как потенциальное лекарственное средство .

Антиоксидантная активность Водно–спиртовый экстракт золотарника обыкновенного как компонент препарата Phytodolor ингибировал образование активных форм кислорода .

Анальгетическая активность Экстракт золотарника обыкновенного проявлял анальгетическую активность, воздействуя на брадикининовые рецепторы .

Установлена эффективность жидкого экстракта золотарника чилийского при лечении люмбаго: в течение 15 дней кожу смазывали гелем, содержащим 5% экстракта золотарника чилийского, и добились значительного анальгетического эффекта .

Спазмолитическая активность Наличие флавоноидов (кверцетин и кемпферол) в золотарнике обыкновенном обуславливало установленное вазодилаторное действие, зависящее от ингибирования протеинкиназы С, ингибирования фосфодиэстеразы и циклических нуклеотидов, а также уменьшения поступления ионов Ca 2 + .

Антибактериальная активность

Эфирное масло золотарника обыкновенного и з. канадского оказывало антибактериальную активность в отношении Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa . Сухие и жидкие водно–спиртовые экстракты золотарника обыкновенного, з. канадского, з. гигантского эффективны против Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Chlamydia pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa . Водный экстракт корневищ золотарника чилийского подавлял активность Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa .

Противогрибковая активность

Деацилированные тритерпеновые сапонины золотарника обыкновенного проявляли противогрибковую активность в отношении видов рода Candida (Candida аlbicans, C. tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis, C. pseudotropicalis, C.

guilliermondi, C. glabrata и Cryptococcus neoformans) выше, чем смесь сапонинов . В других экспериментах показана противогрибковая активность спиртового экстракта золотарника обыкновенного в отношении дерматофитов, особенно в отношении Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum и M. canin.

Противогрибковая активность в отношении Candida albicans была очень низкой.

Противомикробную активность также проявляет и золотарник гигантский .

Противоопухолевая активность

Тритерпеновые сапонины проявляют противоопухолевую активность . Значительная противоопухолевая активность виргауреасапонина Е, выделенного из золотарника обыкновенного, в дозе 1 мг/кг/сут. была установлена в экспериментальной модели саркомы у мышей . В другой серии экспериментов был продемонстрирован противоопухолевый эффект полисахаридов золотарника обыкновенного в отношении простаты, рака молочной железы, меланомы и рака легких. Рост опухоли подавлялся в дозе 5 мг/кг .

Противоопухолевая активность наблюдалась у гексанового, хлороформного, этилацетатного и 50% водно–спиртового экстракта золотарника канадского в отношении клеток линии HeLa и MCF–7 .

Иммуномодулирующая активность Иммуномодулирующая активность (индукция макрофагов и активация NK–клеток), а также противоопухолевая активность тритерпенового сапонина виргауреасапонина Е была показана в экспериментах in vitro .

Антиагрегантная активность Дитерпены, содержащиеся в водном экстракте золотарника чилийского, ингибировали АДФ–индуцированную агрегацию тромбоцитов в крови человека; а сапонины блокировали кальциевые каналы, что свидетельствовало об антиагрегантной активности золотарника чилийского .

Сырье золотарника входит в состав 21 наименования мирового фармацевтического рынка, из которых в России представлены 6 (таблица 1.2).

–  –  –

Золотарник обыкновенный имеет медоносное значение ; является кормовым растением для северных оленей, амурского горала и бобров. Однако, для овец это растение ядовито .

Применялся в качестве дубильного и красильного растения, из травы и цветков которого извлекали желтую и коричневую краски .

Эфирное масло золотарника обладает оригинальным запахом .

Листья золотарника используются как ароматическая приправа .

Таким образом, виды рода золотарник являются довольно распространенными растениями, содержащими богатый комплекс БАС, нашедшими свое применение не только в медицине, но и в других сферах деятельности.

ВЫВОДЫ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

1. В результате изучения литературных данных установлено, что фитохимическое изучение золотарника кавказского не проводилось, но имеются данные, что для видов рода Золотарник установлено присутствие таких классов биологически активных соединений, как флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, кумарины, сапонины, полиацетиленовые соединения, полисахариды, ароматические соединения.

2. Изученные в большей или меньшей степени виды рода Золотарник обладают широким спектром фармакологической активности: диуретическим, спазмолитическим, противовоспалительным и т.д.

3. Приведенные сведения о культивировании видов рода Золотарник свидетельствуют о перспективности изучения возможностей выращивания золотарника кавказского.

4. Анализ данных литературы показал, что золотарник кавказский является фармакогностически неизученным растением Кавказа.

ГЛАВА 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

–  –  –

Объектами исследования являлись трава и корневища с корнями золотарника кавказского (рисунок 2.1). Трава заготавливалась в начале цветения путем срезания верхней части длиной 25-30 см без грубых оснований стеблей с изменившими окраску листьями в 2009–2013 гг.

на территории Северного Кавказа:

Республика Карачаево–Черкесия, Карачаевский район (перевал Гумбаши, ущелье р. Даут к перевалу Учкулан, верховье р. Даут на перевале Эпчик), Республика Кабардино–Балкария, Чегемский район (г. Чегем) и Зольский район (урочище Джилы–Су), также использовалась трава, заготовленная от культивируемых растений в 2011– 2013 гг. Траву з. кавказского сушили на воздухе в тени под навесами и в хорошо проветриваемых помещениях. После сушки из сырья удаляли часть стеблей, почерневшие листья и посторонние примеси. Корневища с корнями заготавливали от культивируемого золотарника кавказского ранней весной 2014 г., выкапывая вручную. Корневища с корнями очищали от остатков надземных частей и земли, промывали, сушили в хорошо проветриваемом помещении.

Рисунок 2.1 – Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.

–  –  –

2.2.1 Химические реакции Наличие биологически активных веществ в траве и корневищах с корнями з. кавазского устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций .

Для обнаружения флавоноидов использовали спиртовое извлечение (спирт этиловый 70%) в соотношении 1:10, с которым проводили цианидиновую пробу (восстановление магнием в присутствии хлористоводородной кислоты концентрированной) и реакцию с алюминия хлоридом.

Для установления наличия тритерпеновых сапонинов готовили водное извлечение 1:10 кипячением на водяной бане в течение 10 минут, охлаждали и фильтровали. В 2 пробирки помещали по 2 мл фильтрата. В первую пробирку прибавляли хлористовородную кислоту 0,5 М, во вторую – натрия гидроксид 0,5 М. Пробирки встряхивали и наблюдали пену как в кислой, так и в щелочной средах (тритерпеновые сапонины). Для проведения реакции Либермана– Бурхарда навеску травы золотарника кавказского (10,0 г) обезжиривали бензолом, проводили экстракцию последовательно хлороформом и метанолом. Метанольное извлечение упаривали и к сухому остатку прибавляли укусный ангидрид и серную кислоту концентрированную.

Присутствие дубильных веществ определяли в водном извлечении (массо–объемное соотношение 1:10, продолжительность экстракции 5 мин) по реакции с раствором квасцов железоаммонийных.

Для обнаружения кумаринов была использована лактонная проба. Готовили извлечение из сырья золотарника кавказского спиртом этиловым 95% в соотношении 1:10 путем кипячения в течение 15–20 мин на водяной бане с обратным холодильником. К 5 мл приготовленного извлечения прибавляли 10 капель спиртового раствора натрия гидроксида 10% и нагревали на водяной бане.

Затем добавляли 10 мл воды и 15 капель хлористоводородной кислоты 10%.

Идентификацию аминокислот проводили в кислотном извлечении (хлористоводородная кислота, массо–объемное соотношение 1:10, температура 70 С, 10 мин) по биуретовой реакции и реакции с нингидрина раствором.

Обнаружение углеводов осуществляли с помощью реакции Бертрана и со спиртом этиловым 95%.

2.2.2 Хроматографические методы исследования Для проведения хроматографического анализа использовалась хроматографическая бумага «Filtrak», а также пластинки «Sorbfil» (ПТСХ–П–В–УФ).

Пластинки для ТСХ–анализа предварительно выдерживали в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 1 часа с целью их активирования. Методика обнаружения: на линию старта хроматографической пластинки размером 1515 или хроматографической бумаги наносили с помощью микрошприца по 5 мкл или 10 мкл соответственно извлечения из травы з. кавказского. Параллельно наносили по 5 мкл растворов рабочих стандартных образцов. Хроматографические камеры предварительно насыщали парами растворителей в течение 40 – 60 мин в случае ТСХ и в течение 12–16 часов в случае бумажной хроматографии. Хроматографирование осуществляли восходящим способом в герметично закрытой камере, содержащей соответствующую систему растворителей.

Анализ хроматограммы проводили, когда фронт растворителя достигал 13 см для ТСХ или 40 см для БХ. После хроматографирования пластинки высушивали на воздухе под вытяжным шкафом, просматривали в видимом и УФ–свете, обрабатывали определенным реагентом с помощью пульверизатора .

ВЭЖХ использовалась для анализа фенольных соединений и органических кислот. Анализ проводили на хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром» для «Windows».

Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, со временами удерживания растворов стандартных образцов. Оценку количественного соотношения идентифицированных веществ проводили по площади пиков, используя метод внутренней нормализации .

Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их кислотный гидролиз. Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ

– анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom-5 с пламенно– ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE

– 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 °С; газ–носитель – гелий, 30 мл/мин в виде ацетатов альдононитрилов.

Также для анализа БАС травы золотарника кавказского использовали хромато–масс–спектрометр AT–5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс– спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2 – 950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату.

Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР–5ms Хьюлетт–Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 ° С со скоростью 7 град/мин. Температура инжектора и интерфейса 280 °С. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс–спектров NIST.

2.2.3 Спектральные методы Метод УФ–спектрофотометрии был использован для качественного и количественного определения флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и тритерпеновых гликозидов. УФ–спектры поглощения регистрировали на спектрофотометрах СФ–56 и СФ–2000 в кюветах с толщиной слоя 10 мм в области от 200 до 600 нм .

ИК–спектры образцов углеводов снимали на спектрофотометре Perkin– Elmer model 2000 в таблетках с KBr в соответствии с требованиями ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области» .

Определение содержания макро– и микроэлементов в траве з. кавказского проводили с помощью полуколичественного спектрального метода. Анализ был проведен в центральной испытательной лаборатории «Кавказгеолсъемка». Изучение элементного состава осуществляли на дифракционном спектрографе ДФС–8–1 методом испарения.

2.2.4 Титриметрические методы Количественное определение дубильных веществ в траве золотарника кавказского проводили методом перманганатометрического титрования по методике ГФ XI, вып. 1 . Содержание свободных органических кислот определяли алкалиметрическим методом титрования по методике ГФ XI, вып. 2, ст.

39 «Плоды шиповника» .

2.2.5 Гравиметрические методы Изучение углеводов травы золотарника кавказского проводили гравиметрически по методу, изложенному в монографии Н.К. Кочеткова и M. Sinner .

2.2.6 Ресурсоведческие исследования Ресурсоведческие исследования были проведены согласно методическим указаниям .

Учетные площадки закладывались площадью 1 м 2, на одной учетной площадке помещалось в среднем 5–6 взрослых экземпляров растений. При этом форма площадки (прямоугольная, квадратная, округлая) существенной роли не играла.

После закладки учетных площадок на каждой из них собирали всю сырьевую фитомассу. Собранное сырье после сушки взвешивали.

Расчеты проводили с помощью формул (1, 2, 3, 4):

–  –  –

2.2.7 Фармакологические методы исследования Изучение «острой» токсичности проводилось по методу Кербера .

«Острая» токсичность была изучена на 42 аутбредных белых мышах самцах весом 22-30 г, прошедших карантин в течение 10 дней. Экстракт золотарника кавказского вводили внутрижелудочно при помощи зонда. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество физиологического раствора. Наблюдение за опытными животными проводилось в течение 2–х недель, в первый день непрерывно. Фиксировалось общее состояние животных, особенности их поведения, интенсивность и характер двигательной активности, время наступления смерти после введения препарата. Все расчеты проводились методом наименьших квадратов с использованием пробит анализа и обрабатывались с помощью программы «StatPlus 2009».

Изучение диуретической активности сухого экстракта золотарника кавказского было проведено на 24 белых крысах–самцах линии «Wistar» массой 300–450 г. Мочу собирали утром натощак в течение 2–х часов после 2,5% водной нагрузки. Сухой экстракт золотарника кавказского в виде водного раствора вводили за час до создания водной нагрузки. Интактная группа животных получала эквиобъемное количество воды.

Антибактериальное действие изучали в соответствии с ГФ XII .

2.2.8 Отбор проб для анализа Отбор проб для анализа осуществляли в соответствии с ОФС 42–0013–03 «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб»

2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья проводили визуально по ГФ XI .

Анатомические исследования выполняли по методике ГФ XI и Г.Г.

Фурста . Микропрепараты изучали с помощью микроскопов «Биолам» и «Биомед». Использовали объективы 4, 8, 10, 40, окуляр 16. Микрофотосъемка выполнена с использованием цифровых камер Nikon Coolpix и L33.0 mp cmos microscope digital camera eyepiece new.

Для проведения микроскопического анализа использовали временные препараты, приготовленные из высушенного сырья. Цельное сырье просветляли в системе спирт этиловый – глицерин – вода в соотношении 1:1:1. Срезы, полученные вручную с помощью лезвия, окрашивали реактивом на одревеснения – спиртовый раствор флороглюцина 1% и раствор серной кислоты 50%. Анатомическое строение рассмотрено в соответствии с ГФ XI, вып. 1 .

2.2.10 Определение числовых показателей Определение влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% кислоте хлористоводородной, экстрактивных веществ в траве золотарника кавказского проводили по методикам, описанным в ГФ XI изд., вып. 1 и 2 , а также ГФ XII изд. .

2.2.11 Валидация методики количественного определения Валидация методики количественного определения флавоноидов в траве золотарника кавказского проводилась в соответствии руководством ICH «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» .

2.2.12 Микробиологическая чистота Определение микробиологической чистоты сырья золотарника кавказского проводили в соответствии с требованиями ГФ ХII, вып.1, с.160, ОФС 42– 0067–07 «Микробиологическая чистота» .

2.2.13 Определение сроков годности Для определения срока годности использовали сырье, хранившееся в сухом, хорошо проветриваемом и защищенном от прямых солнечных лучей помещении, в тканевых мешках в соответствии с ГОСТ 30090–93. Для определения срока годности экстракта, он был заложен на длительное хранение в естественных условиях при комнатной температуре. В процессе хранения испытуемых образцов каждые 6 месяцев определялись числовые показатели по ГФ XI и ГФ XII , а также содержание БАС.

2.2.14 Методы статистической обработки Статистическую обработку результатов исследований проводили в соответствии с требованиями ГФ ХI, вып.1 . Расчеты осуществляли с использованием программы Microsoft Office Excel.

ГЛАВА 3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РЕСУРСОВЕДЧЕСКИЕ

ИССЛЕДОВАНИЯ ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО И ИЗУЧЕНИЕ

ВОЗМОЖНОСТЕЙ ВВЕДЕНИЯ ЕГО В КУЛЬТУРУ

3.1 Определение урожайности травы золотарника кавказского

Первым этапом нашей работы являлось изучение природных ресурсов золотарника кавказского, поскольку подобные исследования ранее не проводились. Для реализации данного этапа нами были поставлены следующие задачи:

изучить ареал распространения золотарника кавказского в некоторых районах Северного Кавказа;

определить урожайность травы золотарника кавказского;

определить биологический и эксплуатационный запас травы золотарника кавказского, а также рассчитать объем возможной ежегодной заготовки;

Золотарник кавказский распространен в Предкавказье, Восточном и Западном Закавказье. Предпочитает альпийские и субальпийские луга, заросли рододендрона, можжевельника, высокогорных ив, осыпи, опушки лесов у верхней их границы, вырубки и лесные поляны в высокогорных лесах до 3500 м.

При выборе районов исследования учитывали данные литературы о местах обитания золотарника кавказского .

Учитывая, что золотарник кавказский – многолетнее травянистое растение, сырьем которого является трава, урожайность определяли методом учетных площадок. В таблице 3.1 представлен подробный пример расчета урожайности травы золотарника кавказского в районе г. Чегем (Кабардино–Балкарская Республика).

Таблица 3.1 – Расчет урожайности травы золотарника кавказского

–  –  –

В результате экспедиционных работ обследованы некоторые районы произрастания золотарника кавказского на Северном Кавказе: Республика Карачаево–Черкесия, Карачаевский район (перевал Гумбаши, ущелье р. Даут к перевалу Учкулан, верховье р. Даут на перевале Эпчик), Республика Кабардино– Балкария, Чегемский район (г. Чегем) и Зольский район (урочище Джилы–Су).

Для определения периодичности заготовки сырья были проведены исследования по определению скорости восстановления надземной фитомассы после ее срезки. Для этого в ущелье р. Даут (Карачаево–Черкесская Республика) были заложены площадки площадью около 50 м2, на которых проводили заготовку сырья в четырех различных вариантах: I – ежегодная срезка; II – один год «отдыха» после срезки; III – два года «отдыха» после срезки; IV – три года «отдыха» после срезки надземной массы.

В результате проведенных исследований по заготовке сырья золотарника кавказского были получены следующие результаты.

При ежегодной заготовке травы золотарника кавказского на одном и том же участке наблюдалось отставание в росте на 10–15 см по сравнению с контрольными экземплярами. Урожайность воздушно–сухого сырья при ежегодной заготовке составляла около 10 г/м2. В то время, как в других вариантах эксперимента с «отдыхом» один, два и три года наблюдалось постепенное улучшение состояния растений и повышение накопления фитомассы.

Экспериментально установлено, что урожайность надземной части травы золотарника кавказского в варианте с трехлетним «отдыхом» (15 г/м 2) близка к урожайности на контрольной площадке (17 г/м 2). Поэтому мы рекомендуем увеличить продолжительность перерыва в эксплуатации зарослей еще на один год в целях гарантии надежного восстановления надземной фитомассы, т.е. заготовку сырья на одной и той же площадке проводить лишь по истечении четырех лет после предыдущей, соблюдая при этом строгую очередность эксплуатации массивов.

Таким образом, периодичность заготовок сырья золотарника кавказского составляет 4 года, так как это оптимальный срок для восстановления его зарослей (таблица 3.2).

–  –  –

В результате этих исследований установлено, что общая площадь зарослей травы золотарника кавказского в 5 исследованных районах Северного Кавказа составляет около 28 га, при этом объем возможных ежегодных заготовок – более 1150 кг.

3.3 Исследования по введению золотарника кавказского в культуру Для сохранения дикорастущих зарослей золотарника кавказского нами была предпринята попытка введения его в культуру.

Интродукционные исследования проводились в Ставропольском крае, г.

Зеленокумск СПК агрофирма «Дружба» в 2009–2014 гг. Посадочный материал был заготовлен в урочище Джилы-Су Кабардино-Балкарской Республики.

Первоначально была установлена лабораторная всхожесть семян.

Проращивание семян золотарника кавказского проводили в чашках Петри, на дно которых укладывали смоченную водой фильтровальную бумагу. Семена раскладывали на дне чашки Петри равномерно на расстоянии 0,5-1 см друг от друга. Проращивание проводили при комнатной температуре (22-24 °С).

В результате было установлено, что семена начинают прорастать на 3 день. Однако период прорастания может варьировать от 3 до 20 дней. При этом всхожесть свежесобранных семян достаточна низкая (около 30%), но при хранении она увеличивается. Через месяц после сбора всхожесть составляет 37%, через два – 45%. Максимальная всхожесть наблюдается через полгода после сбора – 82% и уменьшается при длительном хранении. При хранении в течение 1 года – 74%, через 2 – 50%.

Для определения полевой всхожести были проведены два посева: осенний (в ноябре) и весенний (в апреле). Поскольку семена очень мелкие и легкие, перед посевом их смешивали с песком. Семена сеяли по поверхности, слегка присыпали землей и немного утрамбовывали.

Полевая всхожесть семян при всех сроках посева не превысила 20%. Высота сеянцев в конце первого года жизни составляла 1-10 см, всходы длительное время оставались мелкими, вступление в генеративную фазу на второй год у растений отмечалось единично, на третий год – массово.

Таким образом, семенной способ размножения золотарника имеет ряд затруднений: мелкие семена, медленный рост всходов, зарастание посевов сорняками, выход товарной продукции лишь на третий год развития золотарника кавказского.

Более перспективным является размножение отрезками корневищ. Размножение отрезками корневищ осуществляли осенью (октябрь). Корневища золотарника кавказского разделяли так, чтобы у каждой посадочной единицы сохранилось не менее двух почек возобновления. Растения вступали в генеративную фазу уже в первый год жизни (80%). В дальнейшем проводили повторные опыты разделения корневищ весной и осенью.

Максимальная приживаемость отрезков корневищ (рисунок 3.1) наблюдалась при осенней посадке (80%), при весенней посадке процент приживаемости составил 65.

Рисунок 3.1 – Появление всходов золотарника кавказского при размножении отрезками корневищ Урожайность травы при размножении золотарника кавказского отрезками корневищ при осенней посадке составила 204 ± 5,6 кг/га, а корневищ с корнями

– 143 ± 4,8 кг/га.

В результате наблюдений за золотарником кавказским выделены следующие фенологические фазы:

начало вегетации;

фаза стеблевания – один побег (или сразу несколько) достигает длины 1 см у 10% растений. Массовое стеблевание – побег достигает длины 1 см у 50% растений, конец стеблевания – побег достигает длины 1 см у последних единичных растений;

фаза бутонизации – один бутон или несколько окрашиваются.

Начало фазы – при окрашивании бутонов у 10% растений, массовая фаза – при окрашивании бутонов у 50% растений, конец фазы бутонизации – при окрашивании бутонов у последних единичных растений;

фаза начала цветения – при раскрывании одного или сразу нескольких цветков у 10% растений. Массовое цветение – при раскрывании цветков у 50% растений. Конец фазы – при раскрывании цветков у последних единичных растений.

фаза плодоношения – при появлении плодов.

Траву золотарника кавказского собирали в фазу начала цветения. Сушили на воздухе в тени и в хорошо проветриваемых помещениях или в сушилках при температуре 50-60 °С. После сушки из сырья удаляли стебли, почерневшие листья и посторонние примеси. Сырье хорошо хранится, не подвержено порче вредителями и плесенью.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

1. Проведено ресурсоведческое исследование травы золотарника кавказского в 5 районах Северного Кавказа: Республика Карачаево–Черкесия, Карачаевский район (перевал Гумбаши, ущелье р. Даут к перевалу Учкулан, верховье р. Даут на перевале Эпчик), Республика Кабардино–Балкария, Чегемский район (г. Чегем) и Зольский район (урочище Джилы–Су).

Урожайность травы золотарника кавказского составляет 173–204 кг/га в зависимости от места сбора сырья. Урожайность корневищ с корнями, заготовленных от культивируемого золотарника кавказского, – 143 ± 4,8 кг/га.

2. Общая площадь зарослей травы золотарника кавказского на обследованной территории Северного Кавказа составляет около 28 га, при этом рекомендуемый объем заготовок – более 1 т. Таким образом, золотарник кавказский обладает достаточной сырьевой базой.

3. Изучение возможностей введения золотарника кавказского в культуру дали положительный результат. Установлено, что наиболее эффективным является размножение отрезками корневищ, т.к. растение вступает в генеративную фазу уже в первый год жизни. В связи с полученными результатами рекомендуем заготавливать сырье, как от дикорастущего, так и от культивируемого золотарника кавказского.

ГЛАВА 4 МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И АНАТОМО–

ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ

С КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО

4.1 Морфологическая характеристика «Золотарника кавказского травы»

Цельное сырье. «Золотарника кавказского трава» представляет собой смесь цельных или измельченных листьев, верхушек цветущих побегов длиной 25-30 см, отдельных осыпавшихся цветков, недозрелых плодов, их хохолков, а также целых соцветий (рисунок 4.1). Стебли цилиндрические. Листья яйцевидно–продолговатые, продолговато–ланцетные или ланцетные, пильчатые, суженые в окрыленный черешок, короче листовой пластинки. Корзинки мелкие 15– 20 мм шириной, собранные в колосовидное соцветие. Обвертка конически– колокольчатая. Листочки корзинки рыхло расположенные, 2–3–рядные, наружные ланцетные в 1,5-2 раза короче узколинейных внутренних, те и другие слегка опушенные, острые. Цветки мелкие желтые. Плод – семянка с хохолком из тонких белых волосков. Запах специфический, вкус горьковатый, слабовяжущий.

Отличительными морфологическими признаками являются 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, ножки корзинок обычно без прицветников.

Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев зеленого цвета, соцветий, цветков желтого цвета различной формы и незрелых плодов, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Запах специфический. Вкус водного извлечения пряный, горьковатый.

Порошок. Порошок травы зеленого цвета с желтыми вкраплениями, проходящий сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм. Запах и вкус водного извлечения специфический.

Рисунок 4.1 – Цельная «Золотарника кавказского трава»

–  –  –

4.2.1 Строение листа с поверхности При рассмотрении листа с поверхности видны клетки верхнего эпидермиса (рисунок 4.2), они изодиаметрические, многогранные, овальные или округлые. Стенки клеток слабоизвилистые, их утолщенность равномерная. Местами может наблюдаться слабо выраженная морщинистость кутикулы (продольно–морщинистая). Имеются устьица; околоустьичных клеток 4-5, они такой же формы, как и основные клетки эпидермиса (аномоцитный тип устьичного аппарата). Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные овальной формы.

Устьица расположены в одной плоскости с эпидермисом (рисунок 4.3). Волоски железистые и простые. Железистые короткие на одно–, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой, их места прикрепления обычные (рисунок 4.4). Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса (рисунок 4.5). Секреторные каналы, млечники, вместилища, каналы, включения не обнаружены.

Нижний эпидермис (рисунок 4.6) состоит из клеток многогранной формы с более извилистыми стенками. Клетки меньших размеров, чем на верхнем эпидермисе; устьиц больше на нижнем эпидермисе. Устьичный аппарат аномоцитного типа, околоустьичных клеток 3-6 (рисунок 4.7). Имеются простые и железистые волоски такого же типа, как в верхнем эпидермисе, но простые волоски более короткие.

Рисунок 4.2 – Фотография строения верхнего эпидермиса листа золотарника кавказского с поверхности (ув.

640) Рисунок 4.3 – Строение верхнего эпидермиса листа с поверхности золотарника кавказского:

1 – основные клетки эпидермиса, 2 – устьице, 3 – железистый волосок, 4 – простой многоклеточный волосок, 5 – розетка из клеток эпидермиса Рисунок 4.4 – Фотография строения железистых волосков на верхнем эпидермисе листа золотарника кавказского (ув. 640) Рисунок 4.5 – Фотография строения простых волосков на верхнем эпидермисе листа золотарника кавказского (ув. 160) Рисунок 4.6 – Фотография строения нижнего эпидермиса листа золотарника кавказского с поверхности (ув. 640)

–  –  –

4.2.2 Строение листа на поперечном срезе Лист на поперечном срезе имеет дорсовентральный тип строения. Жилки хорошо выделяются на нижней стороне. Клетки верхнего эпидермиса квадратной формы, плотно расположены в один слой. Содержимое клеток бесцветное.

Имеются устьица и волоски простые многоклеточные и железистые на одно–, двухклеточной ножке и одноклеточной головкой темно–коричневого цвета (рисунок 4.8).

Нижний эпидермис состоит из клеток меньших размеров, чем верхний, также имеюся устьица, простые и железистые волоски.

Мезофилл листа дифференцирован на палисадный и губчатый. Палисадный (верхний) мезофилл – это два слоя клеток овальной и прямоугольной формы, расположенный под верхним эпидермисом, клетки живые тонкостенные, содержат большое количество хлоропластов. Палисадный мезофилл занимает чуть более половины объема пластинки листа. Губчатый (нижний) мезофилл состоит из клеток округлой или овальной формы с хлоропластами, которых меньше, чем в клетках палисадного мезофилла. Располагается губчатый мезофилл между палисадным и нижним эпидермисом (рисунок 4.9).

По жилке листа встречается колленхима. Ее первый участок расположен под верхним эпидермисом и несколько слоев клеток – под нижним эпидермисом. На границе жилки с пластинкой расположена хлоренхима.

Центральная часть жилки занята большим проводящим пучком. Пучок округлой формы, коллатерального типа, имеется камбий (открытый тип). Сосуды ксилемы располагаются рядами. По объему ксилемы чуть больше, чем флоэмы.

Со стороны ксилемы и флоэмы располагается уголковая колленхима. Вокруг пучка хорошо видны обкладочные клетки, которые располагаются в 1-2 слоя и содержат хлоропласты. Остальная часть жилки занята выполняющей паренхимой. Клетки ее округлой или многогранной формы, более круглые в средней части под пучком и над пучком около хлоренхимы.

Рисунок 4.8 – Фотография строения листовой пластинки з.

кавказского на поперечном срезе (ув.

128) Рисунок 4.9 – Рисунок и схема строение листовой пластинки золотарника кавказского на поперечном срезе:

1 – простой кроющий волосок, 2 – железистый волосок, 3 – эпидермис верхний, 4а – мезофилл палисадный, 4б – мезофилл губчатый, 5 – эпидермис нижний, 6 – колленхима уголковая,7 – клетки обкладочные, 8 – ксилема, 9 – камбий, 10 – флоэма, 11 – паренхима

4.3 Анатомическое строение стебля

4.3.1 Строение стебля с поверхности Покровная ткань стебля представлена эпидермисом. Его клетки многогранной формы разных размеров с прямыми и слабоизвилистыми стенками, снаружи слабоутолщенными (рисунок 4.10). Кутикула слабо выраженной продольно–морщинистой формы. Устьичный аппарат аномоцитного типа; побочных клеток 3 – 6, устьица овальные, замыкающие клетки чечевицевидные. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные и железистые, места их прикрепления обычные (рисунок 4.11).

–  –  –

Рисунок 4.11 – Строение эпидермиса стебля золотарника кавказского:

1 – основные клетки эпидермиса, 2 – устьице, 3 – простой многоклеточный волосок, 4 – железистый волосок 4.3.2 Строение стебля на поперечном срезе На поперечном срезе стебля видны три основных блока: покровная ткань, кора и центральный осевой цилиндр.

Покровная ткань представлена эпидермисом. Это один слой тонкостенных плотно расположенных клеток со слабоутолщенной наружной стенкой. На эпидермисе имеются простые многоклеточные волоски. Устьица встречаются в небольшом количестве. Секреторные каналы, млечники, вместилища, кристаллы и включения не обнаружены.

Кора состоит из уголковой колленхимы, хлоренхимы, выполняющей паренхимы и эндодермы. Колленхима располагается по ребрам отдельными участками. Ее клетки имеют утолщения по углам. Между участками колленхимы находится хлоренхима (по граням). Ее клетки имеют овальную или округлую форму и расположены в 2-3 слоя. В клетках имеются хлоропласты. Внутренняя кора представлена хорошо выраженной 1-2-слойной эндодермой с довольно мелкими клетками в основном овальной формы, содержащими хлоропласты.

Остальная часть коры занята выполняющей паренхимой, клетки которой имеют разные размеры, овальной, округлой или многогранной формы, расположенные в 4-7 слоев (рисунки 4.12, 4.13).

Центральный цилиндр стебля включает проводящие пучки, расположенные по кругу в количестве 29-30. Проводящие пучки открытые коллатеральные, широкояйцевидной формы, армированные со стороны флоэмы и ксилемы. Участки склеренхимы, прилегающие со стороны флоэмы более крупные (рисунки 4.14, 4.15). Весь остальной стебель занят паренхимой. Большая ее часть приходится на сердцевину стебля, которая может составлять до 50% его объема. Между проводящими пучками имеются сердцевинные лучи, состоящие из более мелких клеток паренхимы с одревесневшими стенками.

Рисунок 4.12 – Схема строения стебля з. кавказского на поперечном срезе:

1 –простой многоклеточный волосок, 2 – железистый волосок, 3 – эпидермис, 4 – колленхима уголковая, 5 – хлоренхима, 6 – паренхима коры, 7 – эндодерма, 8 – склеренхима, 9 – флоэма, 10 – камбий, 11 – ксилема, 12 – паренхима сердцевины

–  –  –

Рисунок 4.14 – Фотография строения фрагмента стебля золотарника кавказского на поперечном срезе (ув.

160) Рисунок 4.15 – Рисунок и схема фрагмента строения стебля золотарника кавказского на поперечном срезе:

1 – эпидермис, 2 – колленхима уголковая, 3 – паренхима коры, 4 – эндодерма, 5 – склеренхима, 6 – флоэма, 7 – камбий, 8 – ксилема, 9 – сердцевинный луч, 10 – паренхима сердцевины, 11 – простой многоклеточный волосок, 12 – хлоренхима, 13 – железистый волосок 4.3.3 Строение стебля на продольном срезе Клетки эпидермиса имеют продолговатую форму с прямыми поперечными перегородками, наружная стенка слабо утолщена. Имеются простые многоклеточные и железистые волоски.

Клетки колленхимы более широкие и более длинные по сравнению с клетками эпидермиса; имеют утолщенные стенки, поперечные перегородки прямые или наклонные (рисунок 4.16). Клетки хлоренхимы имеют хлоропласты, они более короткие по сравнению с клетками колленхимы. Паренхима коры представлена тонкостенными клетками удлиненной формы, более широкими и с прямыми или наклонными поперечными перегородками.

Эндодерма: клетки мелкие, короткие, имеют хлоропласты. Склеренхимные клетки удлиненные с утолщенными стенками, полость небольшая, перегородки наклонные, реже прямые.

Флоэма – живая ткань, состоит из узких удлиненных клеток с выраженными ситовидными пластинами, слоев клеток 3-4. Клетки камбия живые тонкостенные, узкие, удлиненные с заостренными концами (рисунок 4.17).

Ксилема занимает большой объем по сравнению с флоэмой, представлена проводящими элементами – сосудами и клетками паренхимы. Сосуды в составе первичной ксилемы кольчатые и спиральные; имеют вид длинных тонких трубочек, с утолщениями в виде колец или спиралей. Вторичная ксилема состоит из пористых сосудов, они более широкие; хорошо видны поры, поперечные стенки прямые. Клетки паренхимы в составе ксилемы мелкие, с утолщенными стенками, слегка удлиненные.

Остальная часть стебля представлена сердцевинной паренхимой. Клетки в основном прямоугольной формы, тонкостенные, более круглые к центру сердцевины, поперечные стенки прямые .

Рисунок 4.16 – Фотография фрагмента строения стебля золотарника кавказского на продольном срезе (ув.

Рисунок 4.17 – Строение стебля золотарника кавказского на продольном срезе:

1 – паренхима сердцевины, 2 – ксилема, 3 – камбий, 4 – флоэма, 5 – склеренхима, 6 – паренхима коры, 7 – колленхима, 8 – эпидермис, 9 – простой многоклеточный волосок

–  –  –

При рассматривании ложноязычковых цветков с обеих сторон видны прямоугольные клетки эпидермиса с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками, с округлыми хроматопластами (рисунок 4.18).

Кутикула поперечно-морщинистая, устьица не обнаружены (рисунок 4.19). У основания цветка имеются простые многоклеточные тупоконусовидные волоски, тонкостенные с гладкой поверхностью (рисунок 4.20).

При рассмотрении эпидермиса трубчатого цветка (рисунок 4.21-1) видны прямоугольные клетки с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками, с многоугольными хроматопластами (рисунок 4.21-3). Кутикула поперечно-морщинистая, устьица не обнаружены (рисунок 4.21-2). По краю цветка встречаются пучковые волоски, состоящие их нескольких клеток, сросшихся друг с другом (рисунок 4.21-4).

Рисунок 4.18 – Фотография строения эпидермиса ложноязычкового цветка золотарника кавказского (ув.

128) Рисунок 4.19 – Хроматопласты и морщинистость кутикулы ложноязычкового цветка золотарника кавказского (ув. 160) Рисунок 4.20 – Простые волоски у основания ложноязычкового цветка золотарника кавказского (ув. 128) Имеются многочисленные простые многоклеточные волоски с толстой стенкой и тонкой полостью внутри. Некоторые волоски двухконечные (рисунок 4.21-5). Пыльца округлая, поверхность шиповатая, трехбороздная (рисунок 4.21-6).

Рисунок 4.21 – Микрофотографии трубчатого цветка золотарника кавказского: 1 – общий вид (ув.

64); 2 – складчатость кутикулы (ув. 160); 3 – хроматопласты (ув. 160); 4 – пучковые волоски (ув. 128); 5 – простые волоски (ув. 128); 6 – пыльца (ув. 640) Клетки эпидермиса листочков обвертки также прямоугольные с прямыми или слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками и поперечноморщинистой кутикулой. Имеются многочисленные устьица. Устьичный аппарат аномоцитного типа, околоустьичных клеток 4-6. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные или сферовидные. Устьица расположены в одной плоскости с эпидермисом. Головчатые волоски на одноклеточной ножке с одно-, двухклеточной головкой (рисунок 4.22). По краю цветка располагаются сосочковидные выросты (рисунок 4.23-1). На поверхности видны простые многоклеточные остроконусовидные и бичевидные волоски (рисунок 4.23-2). По краю листочков располагаются бахромчатые волоски (рисунок 4.23-3). Эфирномасличные железки ярусного типа (рисунок 4.23-4).

–  –  –

Рисунок 4.23 – Микрофотографии листочка обвертки золотарника кавказского: 1 – сосочковидные выросты по краю листочка (ув.

2 – простые волоски (ув. 160); 3 – бахромчатые волоски (ув. 160);

4 – эфирномасличная железка (ув. 640) В микроперпарате цветка встречаются многочисленные щетинистые волоски (волоски летучки), состоящие из сросшихся друг с другом волосков разной длины со свободными заостренными концами (рисунок 4.24).

–  –  –

Анализ проводили в соответствии с указаниями статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» и по методике приготовления микропрепаратов измельченной (резаной или порошка) травы (листья, цветки, стебли) (ГФ XI, в. 1, с. 278 ).

При рассмотрении микропрепаратов (рисунок 4.25) с поверхности верхней стороны листа видны изодиаметрические клетки эпидермиса многогранной, овальной или округлой формы со слабоизвилистыми равномерно утолщенными стенками. Клетки нижнего эпидермиса мельче, с более извилистыми боковыми стенками. Местами может наблюдаться слабо выраженная морщинистость кутикулы (продольно–морщинистая). Устьичный аппарат аномоцитного типа; околоустьичных клеток 4-5. Они такой же формы, как и покровные клетки эпидермиса. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные овальной формы.

Устьица расположены в одной плоскости с эпидермисом. Волоски железистые и простые. Железистые короткие на одно–, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой, их места прикрепления обычные. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Пыльца округлая, поверхность ее шиповатая, трехбороздная.

Таким образом, для цельного и измельченного сырья «Золотарника кавказского трава» можно выделить следующие диагностические признаки: клетки эпидермиса с извилистыми стенками и слабо выраженной продольно– морщинистой кутикулой. На обеих сторонах листа встречаются многочисленный волоски и железки. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Железистые волоски короткие на одно-, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой.

–  –  –

Характерной особенностью золотарника кавказского является то, что участки колленхимы коры стебля чередуются с хлоренхимой, а эндодерма содержит хлоропласты. На эпидермисе листочков обвертки встречаются эфирномасличные железки ярусного типа. Пыльца округлая, поверхность шиповатая, трехбороздная.

4.6 Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы»

Анализ проводили в соответствии с указаниями статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» и по методике приготовления микропрепаратов порошка травы (ГФ XI, в. 1, с. 278 ).

При рассмотрении микропрепаратов порошка (рисунок 4.26) видны обрывки элементов эпидермиса многогранной, овальной или округлой формы со слабоизвилистыми или извилистыми равномерно утолщенными стенками.

Устьичный аппарат аномоцитного типа; околоустьичных клеток 4-5. Они такой же формы, как и покровные клетки эпидермиса. Замыкающие клетки устьиц чечевицевидные овальной формы. Видны железистые волоски и обрывки простых волосков. Железистые короткие на одно–, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой, их места прикрепления обычные. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса. Видны обрывки сосудов. Пыльца округлая, поверхность ее шиповатая, трехбороздная.

Рисунок 4.26 – Микрофотографии порошка «Золотарника кавказского травы»:

1 – железистый волосок (ув. 640); 2 – обрывок простого волоска (ув. 160); 3 – эпидермис нижней стороны листа (ув. 160); 4 – эпидермис верхней стороны листа (160); 5 – обрывки сосудов (ув. 160); 6 – пыльца (ув. 640) Таким образом, в микропрепарате порошка «Золотарника кавказского травы» обнаруживается достаточное количество диагностических элементов, позволяющих установить подлинность сырья.

–  –  –

Корневища золотарника кавказского ползучие узловатые с придаточными корнями (рисунок 4.27). Корневища цилиндрические, твердые, плотные, слегка изогнутые, не очищенные от опробковевшего слоя, придаточные корни тонкие.

Поверхность корневищ продольно-бороздчатая, кора тонкая, пробка местами отслаивается. Излом шероховатый, неровный. Корневища с корнями 3-7 см длиной, 0,3-0,6 см толщиной. Цвет снаружи серовато-коричневый, при отслаивании пробки желтоватый, на изломе желтоватый, вкус горьковатый .

Рисунок 4.27 – Корневища с корнями золотарника кавказского

4.8 Анатомическое строение корневищ с корнями золотарника кавказского На поперечном срезе корневище (рисунок 4.28) округлое, покровная ткань представлена перидермой. Клетки перидермы прямоугольной формы, плотно расположены, стенки темные.

Кора, которая занимает небольшой объем, представлена клетками паренхимы. Клетки многогранной формы, тонкостенные, плотно расположены. Периферический слой клеток коры выделяется более утолщенными неодревесневшими стенками.

Центральный цилиндр занимает большую часть корневища, проводящая система пучкового типа. Пучки коллатеральные, открытые (имеется камбий), расположены по кругу, тип стели – эустель. В молодом корневище объем ксилемы и флоэмы небольшой. Над флоэмой имеется небольшое количество клеток с утолщенными одревесневшими стенками. Это клетки перициклической склеренхимы. Над флоэмой в области эндодермы располагаются эфиромасличные канальца, количество которых соответствует количеству проводящих пучков. В молодом корневище большая часть его представлена сердцевиной. Клетки сердцевины разные по размерам, в основном округлой формы, расположены плотно, имеются небольшие межклетники, стенки клеток тонкие.

Рисунок 4.28 – Фотография микроструктуры корневища золотарника кавказского на поперечном срезе (ув.

1 – перидерма, 2 – паренхима коры, 3 – перициклическая склеренхима, 4 – эфиромасличный каналец, 5 – флоэма, 6 – ксилема, 7 – паренхима В люминесцентном свете хорошо видны эфиромасличные канальца схизогенного происхождения, овальной формы (рисунок 4.29).

Рисунок 4.29 – Фотография фрагмента корневища золотарника кавказского на поперечном срезе в люминесцентном свете (ув.

160) Придаточный корень на поперечном срезе имеет округлую форму (рисунок 4.30), тип анатомического строения – первичное. Покровная ткань представлена эпиблемой (эпидермисом), клетки ее имеют тонкие стенки, есть выросты в виде корневых волосков.

–  –  –

Кора занимает около 50% объема. Различают экзодерму – наружный слой клеток, мезодерму и эндодерму. Клетки экзодермы многогранной формы с темными стенками расположены в 2-3 слоя. Клетки мезодермы многогранной формы, плотно расположены, стенки клеток не одревесневшие, утолщенные. Более толстые стенки в периферической зоне коры. Эндодерма представлена одним слоем клеток. Клетки плотно расположены, стенки утолщены и темного цвета.

Центральный цилиндр включает проводящие ткани и перицикл. Перицикл располагается непосредственно за эндодермой – это наружный слой клеток центрального цилиндра. В области перицикла имеются семь эфиромасличных каналец овальной формы.

Флоэма располагается прерывистым кольцом, которое окружает ксилему.

Проводящих элементов флоэмы больше в участках расположенных между лучами ксилемы. Клетки флоэмы бесцветные мелкие, тонкостенные без видимых включений.

Центральная часть корня занята паренхимой и ксилемой, которая содержит довольно крупные сосуды, расположенные беспорядочно по срезу. Периферическая часть ксилемы имеет форму семилучевой звездочки. Клетки паренхимы многогранной формы, имеют одревесневшие стенки (рисунок 4.31).

Рисунок 4.31 – Фотография микроструктуры придаточного корня золотарника кавказского на поперечном срезе (ув.

1 – эпиблема, 2 – экзодерма, 3 – мезодерма, 4 – эндодерма, 5 – перицикл, 6 – эфиромасличный каналец, 7 – флоэма, 8 – ксилема, 9 – паренхима Таким образом, для анатомо-диагностического строения корневища характерен небольшой объем коры, эфиромасличные канальцы располагаются над флоэмой, их количество соответствует количеству проводящих пучков. Для придаточных корней характерен первичный тип строения, широкая кора, эфиромасличные канальцы находятся в области перицикла .

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

1. Отличительными морфологическими признаками золотарника кавказского являются 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, ножки корзинок обычно без прицветников.

2. Основные анатомо-диагностические признаки «Золотарника кавказского травы»: клетки эпидермиса с извилистыми стенками и слабо выраженной продольно–морщинистой кутикулой. На обеих сторонах листа встречаются многочисленный волоски и железки. Волоски простые многоклеточные остроконусовидные, тонкостенные с гладкой поверхностью; места их прикрепления обычные или у основания некоторых волосков образуется розетка из клеток эпидермиса.

Железистые волоски короткие на одно-, двухклеточной ножке и с одноклеточной головкой. Характерной особенностью золотарника кавказского является то, что участки колленхимы коры стебля чередуются с хлоренхимой, а эндодерма содержит хлоропласты. На эпидермисе листочков обвертки встречаются эфирномасличные железки ярусного типа. Пыльца округлая, поверхность шиповатая, трехбороздная.

3. Для анатомо-диагностического строения корневища характерен небольшой объем коры, эфиромасличные канальцы располагаются над флоэмой, их количество соответствует количеству проводящих пучков.

Для придаточных корней характерен первичный тип строения, широкая кора, эфиромасличные канальцы находятся в области перицикла.

ГЛАВА 5 ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С

КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО. РАЗРАБОТКА НОРМ

КАЧЕСТВА ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ

–  –  –

Таким образом, в результате проведенных исследований в траве золотарника кавказского обнаружены флавоноиды, тритерпеновые гликозиды, дубильные вещества, кумарины, аминокислоты и углеводы; в корневищах с корнями золотарника кавказского – тритерпеновые гликозиды, дубильные вещества, аминокислоты и углеводы.

5.2 Изучение фенольных соединений травы золотарника кавказского методом БХ Для изучения фенольных соединений методом бумажной хроматографии 50,0 г измельченной травы золотарника кавказского заливали спиртом этиловым 70% до «зеркала», колбу соединяли с обратным холодильником и нагревали, поддерживая кипение в течение 1 часа. Извлечение фильтровали и повторяли операцию еще 2 раза. Спиртовое извлечение выпаривали при пониженном давлении. Затем проводили экстракцию эфиром, этилацетатом и бутанолом последовательно до полного истощения извлечения. Полученные экстракты пропускали через натрия сульфат безводный, упаривали при пониженном давлении.

Эфирное и бутанольное извлечение досушивали на воздухе. Остаток эфирного экстракта растворяли в спирте этиловом 95%, а остаток бутанольного – в спирте этиловом 40%. Полученные извлечения – эфирное, этилацетатное и бутанольное – исследовали методом бумажной хроматографии.

На линию старта хроматографической бумаги наносили микрошприцом по 10 мкл извлечений: водного (точка 1), эфирного (точка 2), этилацетатного (точка 4) и бутанольного (точка 5). В точку 3 наносили 10 мкл СО рутина. Хоматографирование проводили в двух системах растворителей: 1) уксусная кислота 15% (рисунок 5.1 А); 2) бутанол – уксусная кислота – вода 4: 1: 5 (рисунок 5.1 Б). После прохождения фронтом растворителей около 30 см хроматограмму вынимали и высушивали; просматривали в видимом и УФ–свете до и после обработки спиртовым раствором алюминия хлорида.

А Б Рисунок 5.1 – Схема бумажной хроматограммы водного (точка 1), эфирного (точка 2), этилацетатного (точка 4) и бутанольного (точка 5) извлечений из травы золотарника кавказского, а также СО рутина (точка 3) после обработки спиртовым раствором алюминия хлорида в УФ–свете: А – в системе уксусной кислоты 15%; Б – в системе растворителей бутанол – уксусная кислота – вода 4: 1: 5

–  –  –

Таким образом, зоны адсорбции с Rf = 0,63-0,66 (в системе уксусной кислоты 15%), Rf = 0,54-0,56 (в системе БУВ 4:1:5) отнесены к рутину. Полученные данные свидетельствуют о наличии в траве золотарника кавказского флавоноидов и фенолкарбоновых кислот, что позволило продолжить дальнейшие исследования.

5.3 Обнаружение рутина методом ТСХ в «Золотарника кавказского траве»

В качестве метода экспресс–анализа флавоноидов была использована тонкослойная хроматография в различных системах растворителей: бутанол– уксусная кислота–вода (БУВ) (4:1:2), БУВ (4:1:5), хлороформ–этанол–вода (14:6:0,2), уксусная кислота 2%, 15% и 30% с использованием извлечений, полученных с помощью следующих экстрагентов: эфир, этилацетат и бутанол, а также извлечений из сырья спиртом этиловым 40% и 70%. В результате для обнаружения рутина в траве золотарника кавказского была разработана следующая методика.

Аналитическую пробу золотарника кавказского травы измельчали до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, добавляли 50 мл спирта этилового 40%. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Горячее извлечение фильтровали, 25 мл фильтрата переносили в выпарительную чашку и упаривали на кипящей водяной бане до удаления запаха спирта. Остаток разбавляли водой и помещали в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляли 20 мл эфира и экстрагировали в течение 10 мин. Водный (нижний) слой отбрасывали, эфирное извлечение переносили в круглодонную колбу и упаривали на водяной бане при пониженном давлении досуха. Сухой остаток растворяли в 2 мл спирта этилового 70%. На линию старта пластинки «Sorbfil»

(ПТСХ–П–В–УФ) размером 1010 см микрошприцем наносили в первую точку 5 мкл извлечения из золотарника кавказского травы, во вторую – 5 мкл СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами помещали в камеру, предварительно насыщенную не менее 30 мин уксусной кислотой 15%. После хроматографирования пластинку вынимали из камеры и сушили на воздухе 10 мин, обрабатывали спиртовым раствором алюминия хлорида 2% и прогревали в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 5 мин. На хроматограмме испытуемого извлечения появилась зона адсорбции коричневого цвета с Rf 0,71±0,02, соответствующая рутину.

Таким образом, разработана методика обнаружения рутина в золотарника кавказского траве методом ТСХ в системе уксусной кислоты 15%, проявитель – спиртовый раствор алюминия хлорида 2%.

5.4 Изучение фенольных соединений золотарника кавказского травы методом ВЭЖХ Изучение качественного состава фенольных соединений травы з. кавказского продолжили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «GILSTON», модель 305, ФРАНЦИЯ; инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 США с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для «Windows».

В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6250 мм KROMASIL C18, размер частиц 5 микрон.

В качестве подвижной фазы использовали смесь растворителей метанол вода - фосфорная кислота (400:600:5). Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 60 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ–детектора «GILSTON»

UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм и 360 нм.

Для исследования траву золотарника кавказского измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм по (ГОСТ 214–83).

Около 3,0 г измельченного сырья (точная навеска) помещали в колбу вместимостью 150 мл, прибавляли по 40 мл спирта этилового 70%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объемом 50 мл и доводили спиртом этиловым 70% до метки (исследуемый раствор).

Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения в 70% спирте этиловом: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин–7–гликозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, гиперозида, гесперидина, апигенина, кемпферола, виценина, феруловой кислоты, цикориевой кислоты, умбеллиферона, дигидрокумарина, скополетина, эскулетина, кумарина, дикумарина, дигидрокверцитина, катехина, эпикатехина.

По 20 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали в выше приведенных условиях.

Результаты представлены в таблице 5.3.

–  –  –

Впервые установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся 24 фенольных соединения, из которых идентифицированы рутин, умбеллиферон, виценин, эскулетин, дигидрокумарин, гесперидин, галловая кислота, цикориевая кислота, хлорогеновая кислота, кофейная кислота .

5.5 Количественное определение флавоноидов в пересчете на рутин в «Золотарника кавказского траве» методом дифференциальной спектрофотометрии При разработке методики количественного определения флавоноидов в траве золотарника кавказского учитывалось то, что при анализе растительного сырья, содержащего флавоноиды, наибольшее распространение имеют спектрофотометрические методы, основанные на определении продуктов реакции комплексообразования с алюминия хлоридом . Методы позволяют не использовать дополнительные трудоемкие операции по очистке и при этом повысить избирательность определения. Были проведены исследования по использованию метода дифференциальной спектрофотометрии для определения флавоноидов в траве золотарника кавказского.

Максимумы светопоглощения флавоноидов извлечений из травы золотарника кавказского не проявляются вследствие наложения более интенсивных полос поглощения сопутствующих веществ. Поэтому использование прямой спектрофотометрии нецелесообразно. Изучение литературных данных показало, что при использовании дифференциальной спектрофотометрии, основанной на реакции комплексообразования с алюминия хлоридом, происходит батохромный сдвиг полосы поглощения флавоноидов от 330 – 350 до 390 – 412 нм .

Применение в качестве раствора сравнения испытуемого раствора без реактива позволяет исключить влияние окрашенных сопутствующих веществ, выделить полосу поглощения комплексов флавоноидов с алюминия хлоридом, значительно повысить избирательность определения.

Дифференциальный спектр извлечения из золотарника кавказского травы совпадает по положению максимума с дифференциальным спектром рутина, что позволяет определять сумму флавоноидов в пересчете на рутин (рисунки 5.2, 5.3).

Рисунок 5.2 – Спектр поглощения комплекса СО рутина с алюминия хлоридом Рисунок 5.

3 – Спектр поглощения комплекса суммы флавоноидов золотарника кавказского с алюминия хлоридом Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 2,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, добавляли 100 мл спирта этилового 70%. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок колбы. Горячее извлечение фильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. После охлаждения объем извлечения доводили спиртом этиловым 70% до метки и перемешивали (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 1 мл извлечения (раствор А), 0,5 мл уксусной кислоты 33%, 1 мл раствора алюминия хлорида 2% и доводили объем раствора спиртом этиловым 95% до метки (раствор Б). Через 40 минут измеряли оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 410 ± 2 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали раствор, состоящий из 1 мл извлечения (раствор А), 0,5 мл раствора уксусной кислоты 33% и доведенный спиртом этиловым 95% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Параллельно в тех же условиях измеряли оптическую плотность раствора СО рутина.

(5) где A – оптическая плотность испытуемого раствора;

A0 – оптическая плотность раствора СО рутина;

m – масса золотарника кавказского травы, в г;

m0 – масса СО рутина, в г;

Примечания

1. Приготовление раствора стандартного образца рутина: Около 0,05 г (точная навеска) рутина, предварительно высушенного при температуре 130-135 °С в течение 3 ч, растворяли в 85 мл спирта этилового 95% в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждали, доводили объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивали. Срок годности раствора 1 месяц.

2. Приготовление спиртового раствора алюминия хлорида 2%: 2,0 г алюминия хлорида растворяли в 40 мл спирта этилового 95% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводили объем раствора тем же спиртом до метки. Срок хранения раствора 3 месяца.

Статистически обработанные результаты определения суммы флавоноидов в траве золотарника кавказского представлены в таблице 5.4.

–  –  –

Таким образом, содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в траве золотарника кавказского составляет от 1,57±0,03% до 1,95±0,05% .

Для подтверждения пригодности методики количественного определение флавоноидов в пересчете на рутин в траве золотарника кавказского методом дифференциальной спектрофотометрии проводили валидацию . Для этого была установлена область линейной зависимости оптической плотности от концентрации флавоноидов. Извлечения из травы золотарника кавказского готовили по вышеописанной методике из навесок сырья 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5 г.

По результатам проведенного эксперимента построен градировочный график рассматриваемой зависимости (рисунок 5.4).

Рисунок 5.4 – Градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации флавоноидов в траве золотарника кавказского Из представленного рисунка видно, что почти все экспериментальные точки (за исключением последней) лежат на линии тренда.

Следовательно, область линейной зависимости наблюдается в концентрациях 0,00686-0,00699 г/10 мл. Однако, для аналитических целей можно использовать только ту методику, для которой зависимость функции от аргумента коррелирует с коэффициентом r, значение которого должно быть 0,99. Промежуточные данные для вычисr ления коэффициента корреляции r, который вычисляли с помощью программы Microsoft Exel 2007 по формуле (6), представлены в таблице 5.5.

–  –  –

Рассчитанное значение коэффициента корреляции составило 0,992, коэффициенты а и b: 2140,5 и –14,6 соответственно.

Таким образом, уравнение линейной зависимости имеет вид:

–  –  –

Значение коэффициента корреляции максимально приближено к 1, поэтому можно утверждать о наличии линейной зависимости значений оптической плотности от содержания флавоноидов в исследуемом образце.

На рисунке 5.6 график не проходит через начало координат, но значение коэффициента b составляет менее 2% от коэффициента а, что укладывается в допустимое отклонение.

Определение прецизионности методики (на уровне повторяемости) проводили в девяти параллельных измерениях, результаты которых представлены в таблице 5.6.

–  –  –

Относительное стандартное отклонение равно 2,97%, следовательно, методика позволяет получить удовлетворительные по сходимости результаты.

Правильность данной методики устанавливали с помощью определения количественного содержание флавоноидов в пересчете на рутин в извлечениях, полученных путем добавления стандартного образца рутина к навеске сырья.

Результаты эксперимента представлены в таблице 5.7.

–  –  –

Из представленных результатов следует, что средний процент открываемости составил 100,37%, а относительное стандартное отклонение – 2,40%, что соответствует величине RSD, оптимальному для данного метода анализа.

5.6 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского методом спектрофотомерии в пересчете на кофейную кислоту Для количественного определения фенолкарбоновых кислот были получены извлечения из травы и корневищ с корнями золотарника кавказского с помощью спирта этилового 40% и 70%, измерены их спектры поглощения в интервале длин волн 200–600 нм и сравнены со спектром поглощения кофейной кислоты. Спектры поглощения извлечений из травы золотарника кавказского имеют характерные полосы поглощения с максимумами 292 и 329 нм, а извлечений из корневищ с корнями – с максимумами 329 нм. При этом наибольшая оптическая плотность наблюдалась у 40% спиртового извлечения. Спектры поглощения СО кофейной кислоты (рисунок 5.5) и спиртового извлечения из травы (рисунок 5.6) и корневищ с корнями золотарника кавказского (рисунок 5.7) имеют аналогичный характер.

Рисунок 5.5 – УФ–спектр поглощения СО кофейной кислоты Рисунок 5.

6 – УФ–спектр извлечения из травы золотарника кавказского спиртом этиловым 40% Рисунок 5.7 – УФ–спектр извлечения из корневищ с корнями золотарника кавказского спиртом этиловым 40% Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 2,0 г (точная навеска) измельченной травы или около 1,0 г (точная навеска) измельченных корневищ с корнями помещали в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, добавляли 100 мл спирта этилового 40%. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Горячее извлечение фильтровали через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. После охлаждения объем извлечения доводили спиртом этиловым 40% до метки и перемешивали (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 1 мл извлечения (раствор

А) и доводили объем раствора спиртом этиловым 95% до метки (раствор Б).

Измеряли оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 329 ± 2 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм (рисунок 5.8). В качестве раствора сравнения использовали спирт этиловый 95%. Параллельно в аналогичных условиях измеряли оптическую плотность раствора СО кофейной кислоты.

(7) где A – оптическая плотность испытуемого раствора;

A0 – оптическая плотность раствора СО кофейной кислоты;

m – масса сырья золотарника кавказского, в г;

m0 – масса СО кофейной кислоты, в г;

W – потеря в массе при высушивании сырья, в %.

Примечание Приготовление раствора стандартного образца кофейной кислоты: около 0,05 г (точная навеска) кофейной кислоты помещали в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяли в 200 мл спирта этилового 40% при нагревании на кипящей водяной бане, охлаждали, доводили объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивали.

Результаты количественного определения фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту приведены в таблице 5.8.

–  –  –

Таким образом, содержание фенолкарбоновых кислот в траве золотарника кавказского составляет 0,88±0,03%, а в корневищах с корнями – 1,35±0,05%.

5.7 Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского проводили методом перманганатометрического титрования по методике ГФ XI, вып. 1 . Результаты представлены в таблице 5.9.

Таблица 5.9 – Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского (Vко = 4,1 мл)

–  –  –

2,3802 7,8 7,20 Таким образом, содержание дубильных веществ в траве золотарника кавказского составляет 9,50±0,20%, а в корневищах с корнями – 7,27±0,13%.

5.8 Изучение тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского Изучение тритерпеновых гликозидов (далее – гликозидов) травы золотарника кавказского проводилось по методике проф. Э.Т. Оганесяна, исследовавшего механизм реакции взаимодействия тритерпеноидов с серной кислотой и разработавшего способ их количественного определения в растениях . УФ– спектрофотометрическое определение гликозидов при взаимодействии с серной кислотой применяется в анализе корневищ аралии маньчжурской .

Около 100,0 г (точная навеска) сырья заливали бензолом «до зеркала» и настаивали в течении суток, периодически перемешивая. Затем бензол сливали и сырье вновь обрабатывали бензолом (кратность операции 3). Далее сырье высушивали, и в аппарате Сокслета проводили многократную экстракцию хлороформом до обесцвечивания получаемого извлечения, после чего сырье высушивали и экстрагировали в аппарате Сокслета метанолом. Метанол отгоняли до 1/20 от первоначального объема, и из оставшегося сгущенного извлечения гликозиды осаждали десятикратным объемом эфира. Надосадочную жидкость сливали, осадок затирали стеклянной палочкой в присутствии эфира, после чего фильтровали и сушили в эксикаторе над серной кислотой концентрированной.

Далее проводили гидролиз гликозидов по методике . По окончании гидролиза реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и агликоны экстрагировали эфиром. Эфирный экстракт промывали водой до нейтральной реакции и обезвоживали над натрия сульфатом. Эфир отгоняли, агликоны сушили на воздухе. К 0,0004 г полученных агликонов прибавляли 10 мл серной кислоты концентрированной и термостатировали при 70 °С в течение 1 часа. Спектрофотометрическое определение проводили в диапазоне длин волн 200–400 нм.

Максимум светопоглощения наблюдался при 314 нм, что соответствует максимуму поглощения олеаноловой кислоты.

Таким образом, было установлено, что гликозиды золотарника кавказского являются производными олеаноловой кислоты.

Следующим этапом работы было спектрофотометрическое определение содержания суммы гликозидов в пересчете на агликон – олеаноловую кислоту.

Аналитическую пробу травы золотарника кавказского измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 2,5 г (точная навеска) сырья заливали 50 мл бензола и настаивали в течение суток.

Извлечение фильтровали, бензол сливали, сырье высушивали на воздухе до удаления запаха бензола. Затем прибавляли 50 мл хлороформа и нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Извлечение фильтровали, хлороформ сливали, сырье высушивали на воздухе до удаления запаха хлороформа. Далее сырье трехкратно экстрагировали метанолом порциями по 50 мл на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Метанол отгоняли и проводили гидролиз гликозидов по методике .

Смесь охлаждали, разбавляли водой в 5 раз, а агликоны экстрагировали эфиром.

Эфир отгоняли, полученный остаток (сумма агликонов) сушили на воздухе. Затем к нему прибавляли 10 мл серной кислоты концентрированной и термостатировали при 70 °С в течение 1 ч (раствор А). 1 мл раствора А помещали в мерную колбу на 100 мл и доводили серной кислотой концентрированной до метки (раствор Б). Спектрофотометрическое определение проводили в диапазоне длин волн 200–400 нм (рисунок 5.8).

Рисунок 5.8 – УФ–спектр раствора суммы агликонов тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского в серной кислоте концентрированной Приготовление раствора стандартного образца олеаноловой кислоты: к 0,0004 г олеаноловой кислоты прибавляли 10 мл серной кислоты концентрированной (точный объем) и термостатировали при 70 °С в течение 1 часа.

К 2 мл полученного раствора прибавляли 2 мл серной кислоты концентрированной и проводили спектрофотометрическое определение в диапазоне длин волн 200– 400 нм (рисунок 5.9).

–  –  –

Расчет содержания суммы агликонов в траве золотарника кавказского в пересчете на олеаноловую кислоту проводили по формуле (8):

(8) где A – оптическая плотность испытуемого раствора;

A0 – оптическая плотность раствора СО олеаноловой кислоты;

m – масса травы золотарника кавказского, в г;

m0 – масса СО олеаноловой кислоты, в г;

W – потеря в массе при высушивании сырья, в %.

Результаты проведенного определения представлены в таблице 5.10.

–  –  –

–  –  –

Для выделения полиацетиленовых соединений из корневищ с корнями золотарника кавказского навеску сырья массой 40,0 г заливали эфиром петролейным в соотношении 1:10 и настаивали в течение трех недель в темном месте.

Полученное извлечение фильтровали, эфир петролейный отгоняли при пониженном давлении и температуре 40±5 °С. Полученный сухой остаток растворяли в гексане и исследовали методом двумерной ТСХ в системе растворителей хлороформ – эфир петролейный 1:10. В результате была обнаружена зона адсорбции с голубой флуоресценцией в УФ-свете с Rf=0,53-0,55. Данную зону адсорбции смывали эфиром петролейным и регистрировали УФ-спектр (рисунок 5.10). Полученный УФ-спектр с максимумами при длинах волн 239, 251, 263, 278 нм по литературным данным соответствует полиацетилену матрикариаэфиру.

–  –  –

Таким образом, в корневищах с корнями золотарника кавказского нами обнаружено соединение полиацетиленовой природы – матрикариаэфир, ранее идентифицированное в других видах рода Золотарник .

–  –  –

Количественное определение органических кислот в траве золотарника кавказского проводили методом алкалиметрии по методике ГФ XI, вып. 2, ст.

39 «Плоды шиповника» . Результаты представлены в таблице 5.11.

–  –  –

Исследование органических кислот проводили методом ВЭЖХ. Для этого около 3,0 г сырья (точная навеска) помещали в колбу вместимостью 200 мл, прибавляли 70 мл воды очищенной, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Смесь фильтровали в мерную колбу вместимостью 100 мл через бумажный фильтр и объем доводили водой до метки.

Приготовление растворов сравнения органических кислот: по 0,025 г аскорбиновой, лимонной, щавелевой, яблочной, янтарной, виннокаменной кислот помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл растворяли в 25 мл раствора серной кислоты 0,005 М и доводили тем же растворителем до метки.

Условия хроматографирования: высокоэффективный жидкостной хроматограф фирмы «Gilston», Франция; металлическая колонка размером 6,5300 мм ALTECH OA–1000 Organic Acids; температура колонки 60 °С; подвижная фаза – раствор кислоты серной 0,005 М; скорость подачи элюента 3 мл/мин;

продолжительность анализа 65 минут; детектирование: УФ детектор, длина волны 190 нм.

Результаты представлены в таблице 5.12.

Таблица 5.12 – Результаты идентификации органических кислот в траве золотарника кавказского (водное извлечение)

–  –  –

В траве золотарника кавказского выявлено наличие лимонной, яблочной и янтарной кислот, среди которых основной по содержанию является лимонная кислота .

5.12 Изучение углеводов травы золотарника кавказского Для изучения углеводов травы золотарника кавказского навеску сырья (30,0 г) двукратно экстрагировали хлороформом (100 мл) с последующим высушиванием.

Затем остаток сырья дважды экстрагировали кипящим спиртом этиловым 82% для выделения спирторастворимых сахаров (СРС). Полученные экстракты упаривали и хроматографировали на бумаге Filtrak FN 7, 12 в системе бутанол– пиридин–вода (6:4:3) в течение 17-18 часов со стандартными образцами нейтральных моносахаридов. СРС по данным БХ представлены глюкозой, галактозой (проявитель кислый фталат анилина), фруктозой и сахарозой (проявитель 5% мочевина). Идентификацию углеводов проводили в сравнении со стандартными образцами и по величине Rf.

Затем проводили выделение полисахаридов, последовательно экстрагируя водорастворимые полисахариды водой (ВРПС), смесью растворов щавелевой кислоты и аммония оксалата – пектиновые вещества (ПВ), раствором щелочи – гемицеллюлозы (ГМЦ).

Шрот, полученный после экстракции спиртом этиловым 82%, высушивали и проводили трехкратную экстракцию водой в соотношении 1:10; 1:5; 1:2 в условиях постоянного промешивания. Извлечения объединяли, фильтровали, упаривали при пониженном давлении с использованием роторного испарителя до 1/5 первоначального объема извлечения при температуре 45-50 С, затем осаждали трехкратным объемом спирта этилового 95%. Осадок центрифугировали, промывали спиртом этиловым, обезвоживали ацетоном, высушивали и взвешивали.

Для выделения пектиновых веществ остаток сырья, полученный после проведения предыдущих операций, экстрагировали смесью растворов щавелевой кислоты 0,5% и аммония оксалата 0,5% в равных пропорциях в соотношении шрот – экстрагент 1:5, 1:4 и 1:2 на водяной бане при 85-90 С в течение 3 часов. Далее экстракты объединяли, центрифугировали и диализовали. Проводили упаривание полученного извлечения до 1/20 первоначального объема, осаждали шестикратным объемом спирта этилового 95%. Полученный осадок центрифугировали, промывали спиртом этиловым, высушивали и взвешивали.

Для выделения гемицеллюлоз полученный остаток сырья экстрагировали четырех- и трехкратным объемом натрия гидроксида 5% при комнатной температуре. Полученные экстракты объединяли, нейтрализовали уксусной кислотой, диализовали, упаривали диализат до 1/10 первоначального объема и осаждали трехкратным объемом спирта этилового 95%. Осадок очищали, высушивали, как описано выше, и взвешивали.

Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их кислотный гидролиз серной кислотой 10% в соотношении 1:4,9 при температуре 100-105 C в течение 10 часов для ВРПС; 24 ч – ПВ; 72 ч – для ГМЦ в запаянных ампулах . Затем содержимое ампул переносили в стаканчики, ампулы промывали 5 мл воды, нейтрализовали бария карбонатом по универсальному индикатору до нейтральной среды. Полученные растворы фильтровали, фильтры промывали водой до объема фильтратов 10 мл. Далее прибавляли трехкратный объем спирта этилового 95%, тщательно перемешивали, отстаивали 1-2 ч и образовавшиеся осадки фильтровали. Фильтраты упаривали на кипящей водяной бане до объема около 1 мл. Осадки бариевых солей уроновых кислот деионизировали катионитом КУ-2 (Н+) до рН 3-4. Растворы фильтровали, упаривали до получения объема около 1 мл раствора.

Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ – анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom – 5 с пламенно–ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE – 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 С; газ-носитель – гелий, 30 мл/мин, в виде ацетатов альдононитрилов. По количеству составляющих моносахаридов выделенные ВРПС и ПВ относятся к галактанам, ГМЦ – ксиланам. Наибольшее количество галактозы обнаружено во фракциях ПВ. Основными по содержанию являются фракции ПВ и ГМЦ.

Количество уроновых кислот определяли фотоэлектроколорометрическим методом по реакции взаимодействия с карбазолом в сернокислой среде .

Глюкуроновые кислоты идентифицированы во всех фракциях, особенно в ПВ.

Результаты представлены в таблице 5.13.

Таблица 5.13 – Содержание и моносахаридный состав углеводов травы золотарника кавказского

–  –  –

Пектиновые вещества представляют собой порошок темно–коричневого цвета, при нагревании растворяются в воде, образуя вязкие растворы (коэффициент вязкости 10,17). Содержание Кс = 6,75%, Кэ = 3,78%, = 35,89%. Следовательно, ПВ являются низкоэтерифицированными, а достаточно высокое содержание свободных карбоксильных групп делает перспективным данный растительный объект для выделения пектинов с выраженными сорбционными свойствами, особенно в отношении ионов металлов.

Гемицеллюлозы – сыпучий порошок, светло–коричневого цвета, растворяется в щелочи.

ИК–спектры образцов (рисунки 5.11 и 5.12) регистрировали на ИК–Фурье спектрометре фирмы Perkin–Elmer, модель 2000, в пластинках, прессованных с KBr в интервале 4000-500 см-1.

На основании анализа выявленных характеристических полос поглощения в ИК–спектрах углеводных образцов можно сделать следующее заключение.

Практически во всех спектрах анализируемых фракций в областях 3300– 3700 см–1 наблюдается широкая и интенсивная полоса валентных колебаний, как первичных, так и вторичных OH–групп, ассоциированных внутри– и межмолекулярными водородными связями. Наличие данной полосы поглощения можно объяснить присутствием характерных донорно–акцепторных водородных связей гидроксила с замещенным гидроксилом. В области 2930-2810 см–1 находятся полосы валентных колебаний СН–групп.

Наличие выраженных полос валентных колебаний в областях 1758-1605 см–1 и 1479-1412 см–1 характерно для несимметричных и симметричных ионизированных карбоксильных групп соответственно, что предполагает присутствие кислот, прежде всего уроновых, по–видимому, связанных электростатической связью с ионами некоторых S–металлов. Наличие полосы 1753-1742 см–1 в спектрах водорастворимой и кислотной фракциях свидетельствует о валентных колебаниях несимметричных С=О сложноэфирных карбоксильных групп, т.е. о наличии в указанных объектах этерифицированных по карбоксильным группам уроновых кислот.

Кроме того, появление полос поглощения в области 1370 см –1 в ПВ доказывает наличие метоксильной составляющей, т.е. этерификации метанолом карбоксильных групп.

–  –  –

Рисунок 5.12 – ИК-спектр ПВ золотарника кавказского Следовательно, в исследуемых объектах имеющиеся уроновые кислоты характеризуются ионизированными и молекулярными карбоксильными группами, в том числе связанными с ионами S–металлов и этерифицированными метанолом.

Таким образом, учитывая достаточно высокий выход углеводов в траве золотарника кавказского (15,93% в пересчете на воздушно-сухое сырье), полисахариды можно считать перспективной в дальнейшем изучении группой биологически активных веществ .

5.13 Биологически активные соединения травы золотарника кавказского, идентифицированные методом ГЖХ–МС В большинстве лекарственных препаратов из других видов рода Золотарник (Марелин, Цистиум солидаго раствор, Солидагорен, Фитодолор) основу составляют различные экстракты, поэтому для анализа было приготовлено водно– спиртовое извлечение с целью изучения его компонентного состава с помощью ГЖХ–МС.

Траву золотарника кавказского экстрагировали спиртом этиловым 50%, извлечение впоследствии упаривали и высушивали.

Полученное извлечение из травы золотарника кавказского (до 1 мг) силилировали в 20 мкл БСТФА (N,O–бис–(триметилсилил)–трифторацетамид) 15 мин при 80 оС и разбавляли гексаном до 100 мкл. Для анализа 1 мкл смеси вводили в инжектор системы газожидкостного хроматографа – масс–спектрометра в автоматическом режиме. Исследования проводили на хромато–масс– спектрометре AT–5850/5973 Agillent Technologies (США).

Результаты проведенного исследования представлены на рисунке 5.13 и в таблице 5.14.

–  –  –

4.0 0 6.0 0 8.0 0 1 0.0 0 1 2.0 0 1 4.0 0 1 6.0 0 1 8.0 0 2 0.0 0

–  –  –

В ОПТИМИЗАЦИИ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА, СОПРОВОЖДАЮЩИХСЯ БОЛЕВЫМИ ИЛИ ПАРЕСТЕТИЧЕСКИМИ ФЕНОМЕНАМИ Иорда...» ПСИХОФАРМАКОТЕРАПИЕЙ Специальность 14.01.06 - психиатрия Автореферат диссертации на соискан...» К ОРГАНИЗАЦИЯМ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИМ МЕДИЦИНСКУЮ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ Санита...» человека Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Тюмень, 2015 Работа выполнена в государственном бюджетном...» соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2009 Работа выполнена в Московском Государственном медико – стоматологическом универси...» УЧРЕЖДЕНИЯ С УЧЕТОМ ОСОБЕННОСТЕЙ ТЕХНОЛОГИИ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИЩИ (НА ПРИМЕРЕ Г. СТАВРОПОЛЬ) 14.02.01 Гигиена Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата мед...»НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ Серия Медицина. Фармация. 2013. № 4 (147). Выпуск 21 187 НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ УДК 004.891.3 АЛГОРИТМ ПОСТАНОВКИ ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ СТРАХОВОЕ ОБЩЕСТВО «ВЕРНА» (ООО СО «ВЕРНА») ПРАВИЛА СТРАХОВАНИЯ ОТ НЕСЧАСТНЫХ СЛУЧАЕВ И БОЛЕЗНЕЙ

«Фармакогностическое изучение золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.) ...»

-- [ Страница 1 ] --

Пятигорский медико-фармацевтический институт –

филиал государственного бюджетного образовательного учреждения высшего

профессионального образования «Волгоградский государственный

медицинский университет» Министерства здравоохранения

Российской Федерации

На правах рукописи

ФЕДОТОВА ВИКТОРИЯ ВЛАДИМИРОВНА

Фармакогностическое изучение

золотарника кавказского (Solidago caucasica Kem.–Nath.)

14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ

КОНОВАЛОВ Д.А.

ДОКТОР ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК,

ПРОФЕССОР

ПЯТИГОРСК – 201 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ РОДА

ЗОЛОТАРНИК

1.1 История и распространение видов рода Золотарник

1.3 Систематическое положение рода Золотарник

1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник

1.5 Использование сырья видов рода Золотарник

Выводы по обзору литературы

2.1 Объекты исследования

2.2 Методы исследования

2.2.1 Химические реакции

2.2.2 Хроматографические методы исследования

2.2.3 Спектральные методы

2.2.4 Титриметрические методы

2.2.5 Гравиметрические методы

2.2.6 Ресурсоведческие исследования

2.2.7 Фармакологические методы исследования

2.2.8 Отбор проб для анализа

2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья

2.2.10 Определение числовых показателей

2.2.11 Валидация методики количественного определения

2.2.12 Микробиологическая чистота

2.2.13 Определение сроков годности

2.2.14 Методы статистической обработки

ГЛАВА 3 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РЕСУРСОВЕДЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО И ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ

ВВЕДЕНИЯ ЕГО В КУЛЬТУРУ

3.1 Определение урожайности травы золотарника кавказского

3.2 Расчет объема ежегодных заготовок

3.3 Исследования по введению золотарника кавказского в культуру................. 41 Выводы по главе

ГЛАВА 4 МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И АНАТОМО–ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ

ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА

КАВКАЗСКОГО

4.1 Морфологическая характеристика «Золотарника кавказского травы»......... 46

4.2 Анатомическое строение листа

4.2.1 Строение листа с поверхности

4.2.2 Строение листа на поперечном срезе

4.3 Анатомическое строение стебля

4.3.1 Строение стебля с поверхности

4.3.2 Строение стебля на поперечном срезе

4.3.3 Строение стебля на продольном срезе

4.4 Анатомическое строение цветка

4.5 Микроскопический анализ измельченной «Золотарника кавказского травы»

4.6 Микроскопический анализ порошка «Золотарника кавказского травы»...... 66

4.7 Морфологическая характеристика корневищ с корнями золотарника кавказского

4.8 Анатомическое строение корневищ с корнями золотарника кавказского.... 69 Выводы по главе

ГЛАВА 5 ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С

КОРНЯМИ ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО. РАЗРАБОТКА НОРМ

КАЧЕСТВА ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ

5.1 Анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского с помощью качественных реакций

5.2 Изучение фенольных соединений травы золотарника кавказского методом БХ

5.3 Обнаружение рутина методом ТСХ в «Золотарника кавказского траве»..... 78

5.4 Изучение фенольных соединений золотарника кавказского травы методом ВЭЖХ

5.5 Количественное определение флавоноидов в пересчете на рутин в «Золотарника кавказского траве» методом дифференциальной спектрофотометрии

5.6 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского методом спектрофотомерии в пересчете на кофейную кислоту

5.7 Количественное определение дубильных веществ в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского

5.8 Изучение тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского........ 95

5.9 Изучение полиацетиленовых соединений корневищ с корнями золотарника кавказского

5.10 Количественное определение органических кислот в траве золотарника кавказского

5.11 Изучение органических кислот травы золотарника кавказского методом ВЭЖХ

5.12 Изучение углеводов травы золотарника кавказского

5.13 Биологически активные соединения травы золотарника кавказского, идентифицированные методом ГЖХ–МС

5.14 Изучение аминокислотного состава травы золотарника кавказского....... 1

5.15 Изучение минерального состава травы золотарника кавказского............. 1

5.16 Определение некоторых числовых показателей травы и корневищ с корнями золотарника кавказского

5.17 Микробиологическая чистота «Золотарника кавказского травы»............ 1

5.18 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы»............ 1 Выводы по главе

ГЛАВА 6 ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ПО РАЗРАБОТКЕ «ЗОЛОТАРНИКА КАВКАЗСКОГО ТРАВЫ ЭКСТРАКТА

СУХОГО», СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПОЛУЧЕННОГО ЭКСТРАКТА И

ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ

АКТИВНОСТИ

6.1 Получение «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»................. 1

6.2 Разработка методик стандартизации «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.2.1 Общие показатели

6.2.2 Изучение фенольных соединений

6.2.3 Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин методом дифференциальной спектрофотометрии

6.2.4 Количественное определение фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту методом спектрофометрии

6.3 Установление срока годности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.4 Предварительное изучение фармакологической активности

6.4.1 Определение «острой» токсичности «Золотарника кавказского травы». 133 6.4.2 Патоморфологические изменения в органах, вызванные введением извлечения из травы золотарника кавказского в дозе 10000 мг/кг

6.4.3 Изучение диуретической активности «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

6.4.4 Изучение антибактериального действия «Золотарника кавказского травы экстракта сухого»

Выводы по главе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БАС – биологически активные соединения БХ – бумажная хроматография ВРПС – водорастворимые полисахариды ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография ГЖХ – газо-жидкостная хроматография ГЖХ-МС – газожидкостная хромато-масс-спектрометрия ГМЦ – гемицеллюлозы ЛД – летальная доза ЛРС – лекарственное растительное сырье ПВ – пектиновые вещества ПС – полисахариды СО – стандартный образец СРС – спирторастворимые сахара ТСХ – хроматография в тонком слое сорбента ФСП – фармакопейная статья предприятия Ara – арабиноза Gal – галактоза Glс – глюкоза Rha – рамноза UAc – уроновые кислоты Xyl – ксилоза

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования Заболевания мочеполовой сферы в мире по данным Всемирной организации здравоохранения находятся на одном из лидирующих мест в общей структуре заболеваемости населения. На сегодняшний день среди мужчин старше 60 лет в 90% случаях диагностируются заболеваниями почек, мочевого пузыря и предстательной железы. У женщин старше 50 лет уролитиаз, цистит и т.п. отмечается в 70% случаев . Синтетические препараты успешно используются в качестве основных средств при фармакотерапии и профилактике заболеваний почек. Но, несмотря на высокую эффективность, они оказывают и неблагоприятное воздействие на функциональное состояние организма. Биологически активные соединения лекарственных растений обладают широким спектром действия, низкой токсичностью, что позволяет их рекомендовать для длительной терапии. Однако, выбор растительных лекарственных препаратов, оказывающих комплексное нефропротекторное воздействие, ограничен.

Перспективным источником с точки зрения получения нового вида лекарственного растительного сырья (ЛРС) является ранее неизученный представитель флоры Кавказа – золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.-Nath.).

Лекарственные средства на основе некоторых видов рода золотарник широко используются в мировой медицинской практике. Так, экстракт травы золотарника канадского входит в препарат «Марелин» (Украина), применяемый в качестве спазмолитического, диуретического и противовоспалительного средства при лечении и профилактике оксалатного и уратного уролитиаза, а также в состав препарата «Простанорм» (Россия), рекомендуемого при простатите. Экстракт травы золотарника обыкновенного входит в состав препарата «Фитодолор» (Германия), противовоспалительная активность которого сопоставима с таковой индометацина. Подземная часть этого вида золотарника входит в состав БАД «Мен"с формула Простата форте», а также используется в народной медицине Кавказа в качестве ранозаживляющего средства .

В связи с этим изучение золотарника кавказского мы посчитали целесообразным.

Степень разработанности темы Золотарник кавказский является неизученным научной медициной представителем флоры Северного Кавказа.

Цель и задачи исследования Целью работы являлось фармакогностическое изучение золотарника кавказского и научное обоснование возможности использования его в качестве источника сырья для получения лекарственных средств, оказывающих влияние на мочевыделительную систему. Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

Изучить данные научной литературы по распространению, фитохимическому и фармакологическому изучению представителей рода Solidago.

Оценить ресурсные характеристики золотарника кавказского в некоторых районах Северного Кавказа и исследовать возможность его культивирования.

Определить морфолого-анатомические признаки травы и корневищ 3.

с корнями золотарника кавказского.

Исследовать качественный состав и количественное содержание основных групп биологически активных соединений (БАС) травы и корневищ с корнями золотарника кавказского.

Провести предварительное изучение «острой» токсичности, диуретической и антибактериальной активности травы и сухого экстракта золотарника кавказского.

Разработать проект фармакопейной статьи предприятия на «Золотарника кавказского траву».

Научная новизна

В результате проведенных исследований нами впервые:

определены ресурсы золотарника кавказского в отдельных районах его произрастания на Северном Кавказе и изучена возможность его культивирования;

предложены морфологические и анатомо–диагностические признаки, позволяющие установить подлинность травы и корневищ с корнями золотарника кавказского;

методом ВЭЖХ установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся 24 фенольных соединения, из которых идентифицированы флавоноиды (рутин, виценин, гесперидин), кумарины (умбеллиферон, эскулетин, дигидрокумарин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная);

в составе органических кислот в траве золотарника кавказского методом ВЭЖХ идентифицированы лимонная, яблочная и янтарная;

изучены углеводы травы золотарника кавказского, основными по содержанию являются фракции пектиновых веществ (ПВ) и гемицеллюлоз (ГМЦ);

установлено, что трава золотарника кавказского содержит тритерпеновые гликозиды – производные олеаноловой кислоты;

методом ГЖХ–МС в траве золотарника кавказского обнаружены жирные кислоты (дигидроксипропионовая, тригидроксимасляная, гидроксимасляная, пальмитиновая, линолевая, линоленовая, стеариновая кислоты), многоатомные спирты и их производные (глицерин, ксилит, рибит, инозит, мио–инозит, сцило–инозит, глюцитол) и др.;

методом жидкостной хроматографии на автоматическом аминокислотном анализаторе в траве золотарника кавказского впервые обнаружены 15 аминокислот, из которых 9 являются незаменимыми;

установлено, что трава золотарника кавказского содержит 5 макроэлементов и 16 микроэлементов. Из них эссенциальными являются 11 элементов, условно–эссенциальными – 6 и условно–токсичными – 4 элемента;

установлено количественное содержание суммы флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, органических кислот, тритерпеновых гликозидов, дубильных веществ в траве и фенолкарбоновых кислот и дубильных веществ в корневищах с корнями золотарника кавказского;

методом ВЭЖХ в сухом экстракте золотарника кавказского установлено содержание 18 соединений, из которых идентифицированы рутин, лютеолин–7–гликозид, умбеллиферон, виценин, эскулетин, гесперидин, галловая, цикориевая, хлорогеновая и кофейная кислоты;

в сухом экстракте золотарника кавказского методом ВЭЖХ выявлено наличие лимонной, яблочной и янтарной кислот, среди которых по содержанию преобладает лимонная кислота;

установлено содержание суммы флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в сухом экстракте золотарника кавказского;

изучена токсичность «Золотарника кавказского травы», определена диуретическая и антимикробная активность, полученного из нее экстракта.

Теоретическая и практическая значимость работы Изучена возможность использования нового вида отечественного сырья – «Золотарника кавказского травы» для получения суммарного препарата («Золотарника кавказского травы экстракта сухого»), обладающего диуретической и антимикробной активностью.

Разработаны методы качественного и количественного анализа травы золотарника кавказского, основанные на обнаружении фенольных соединений, тритерпеновых гликозидов, органических кислот и полисахаридов. Разработана технологическая схема производства сухого экстракта травы золотарника кавказского. Разработаны нормы, позволяющие стандартизовать траву золотарника кавказского и сухой экстракт из нее с учетом современных требований, предъявляемых к качеству ЛРС и извлечений на его основе.

Методология и методы исследования В работе были использованы методы позволившие провести комплексные фармакогностические (макро– и микроскопические, фитохимические, товароведческие и ресурсоведческие) исследования. В рамках отдельных технологических и фармакологических экспериментов с использованием соответствующих методов исследования были получены предварительные данные, позволившие обосновать возможные направления использования нового вида ЛРС. Фитохимические исследования проводились с использованием бумажной, тонкослойной, газожидкостной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, газожидостной хромато–масс–спектрометрии, спектрофотометрии в УФ–, видимой и ИК– областях.

Положения, выносимые на защиту :

результаты ресурсоведческих и интродукционных исследований золотарника кавказского;

результаты морфолого-анатомического изучения травы и корневищ с корями золотарника кавказского;

результаты фитохимического изучения основных групп БАС в траве и корневищах с корнями золотарника кавказского;

методики стандартизации «Золотарника кавказского травы» и сухого экстракта на ее основе;

результаты предварительных фармакологических исследований.

Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность полученных результатов определяется объемностью изученной информационной базы и обширностью исследования, использованием различных современных физико–химических методов анализа, математико–статистической обработкой полученных данных.

Основные положения диссертационной работы представлены на Международной научной конференции «Рациональное использование природных биологических ресурсов» (Рим–Флоренция, 2013); на II Международной научно– практической конференции «Кластерные подходы фармацевтического союза:

образование, наука и бизнес» (Белгород, 2012); на XХ Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2013); на региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2012, 2013, 2014); на научно-практической конференции молодых ученых и студентов ВолгГМУ "Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины" (Пятигорск, 2014); на региональном подготовительном этапе Конкурса молодежных проектов Всекавказского молодежного Форума «Машук–2013» (Пятигорск, 2013); на Северо–Кавказском молодежном Форуме «Машук–2013» (Пятигорск, 2013). По материалам диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 7 статей – в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Личный вклад автора Автор участвовал во всех этапах экспериментальных работ, в получении исходных данных, их обработке и интерпретации, оформлении диссертационной работы. Автором проведен фитохимический анализ травы и корневищ с корнями золотарника кавказского, исследованы ресурсы травы и изучена возможность введения в культуру золотарника кавказского, установлены морфологические и анатомо-диагностические признаки сырья, проведены предварительные фармакологические исследования экстракта из травы золотарника кавказского.

Объем и структура диссертации

Работа изложена на 163 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, списка цитируемой литературы, включающего 163 источника, из которых 86 на иностранном языке, и приложения. Диссертация иллюстрирована 53 рисунками и 35 таблицами.

ГЛАВА 1 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИДОВ

РОДА ЗОЛОТАРНИК

1.1 История и распространение видов рода Золотарник Золотарник (Solidago L.) известен еще с библейских времен, по одной из версий он является жезлом Аарона. Когда израильтяне возроптали на первосвященника Аарона, Моисей, по повелению Божию, приказал начальникам колен принести свои жезлы. На них Моисей написал имена тех, кому они принадлежали. Все жезлы были положены в скинии собрания перед ковчегом. Оказалось, что только жезл Аарона чудесным образом расцвел за одну ночь, знаменуя этим избранность сословия священников (Библия, чис. 9:4).

Русское название золотарник происходит от слова золото. Оно дано по золотисто–желтым цветкам растения. Название золотая розга дано по форме стебля и цветка. Стебель у этого растения прямой, желобчатый и похож на хлыст.

Родовое название Solidago L. происходит от латинского solidus – крепкий, здоровый и agree – делающий. Французское название Verge d’or происходит от двух слов verge – розга (хлыст) и or – золото. Английское название Goldenrod имеет следующее происхождение: golden – золото и rod – розга.

В словаре Н.И. Анненкова для золотарника обыкновенного (Solidago virgaurea L.) приводится более 50 синонимов, благодаря тому, что он в каждой российской губернии имел свое толкование и название: блошник, полетуха (Могил.), винокур (Нижег.), воронец, заячьи уши (Костр.), зверобой (Моск.), желтый цвет, золотое перо (Тверск.), живительная трава (Перм.), краснуха (Пск.), боровой пуховик (Влад.), перестрел, табака лесная (Гродн.), дикая цыкорiя (Минск.), жовтобрюх (Киев.), nawloc glowienki czerwone (Пол.), woolmete rohi (Эст.), keltainenkukka (Фин.) .

В Канаде, США и Мексике золотарник широко распространен как дикорастущее растение, в Европе – как возделываемое декоративное и одичалое .

Впервые как декоративное интродуцированное растение золотарник зарегистрирован в Ботаническом саду Лондона в 1758 г. . Вскоре он был отмечен в садах и питомниках континентальной Европы . Золотарник стал инвазионным через 100 лет ввиду высокого уровня изменчивости морфолгических признаков . В настоящее время ареал рода в Европе простирается от 42 до 63° с. ш. и ожидается дальнейшее расширение его границ в восточном направлении .

Помимо Европы золотарник также натурализовался в Японии, Корее и на Дальнем Востоке РФ , в Новой Зеландии, Австралии, на Азорских и на Гавайских островах, а также в Мексике .

В СССР золотарник канадский был впервые введен в культуру в 1986 году на Украине c целью получения лекарственного растительного сырья для производства препарата Марелин. После распада СССР культура золотарника канадского была апробирована в России в условиях Ставропольской возвышенности , нечерноземной зоне и Московской области .

Распространение видов рода Золотарник во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) по данным Черепанова С.К. представлено в таблице 1.1.

Золотарник требователен к свету , однако обнаруживается и в тени . Чаще встречается на участках богатых азотом, предпочитает климат с умеренными летними и зимними температурами , обладает широкой устойчивостью к влажности почвы .

Виды рода Золотарник являются корневищными гемикриптофитами и имеют сложный жизненный цикл с поколениями корневищ и семян. Образование семян, новых побегов и корневищ происходит каждый год, а все надземные побеги отмирают в осенний период . В менее благоприятных условиях и под воздействием часто повторяющихся повреждающих факторов образуется больше легких семян, что гарантирует рассеивание на дальние расстояния .

–  –  –

Таким образом, во флоре России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР) встречаются 26 видов рода Золотарник.

1.2 Ботаническая характеристика видов рода Золотарник

–  –  –

Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.–Nath.) – многолетнее травянистое растение со стеблями, немного приподнимающимися при основании или прямостоячими, высотой 30-70 см, у основания слегка или полностью окрашены антоцианом в красный цвет.

Листья яйцевидно–продолговатые, продолговато–ланцетные или ланцетные, пильчатые, суженые в окрыленный черешок, короче листовой пластинки.

Самые верхние листья нередко сидячие.

Соцветие колосовидное, сжатое, плотное или рыхловатое, обычно прерванное. Ножки цветочных корзинок без прицветников или с немногочисленными прицветниками, чаще сильно опушенные.

Корзинки крупные, высотой 1-1,5 см, 1,5-2 см в диаметре. Обвертка конически–колокольчатая. Листочки корзинки рыхло расположенные, немногорядные, наружные ланцетные в 1,5-2 раза короче узколинейных внутренних, те и другие слегка опушенные, острые. Язычки краевых цветков узкопродолговатые, равные по длине обвертке или слегка короче ее. Цветки мелкие желтые, плод семянка .

Отличительными морфологическими признаками являются 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, ножки корзинок обычно без прицветников .

–  –  –

1.4 Химический состав изученных видов рода Золотарник S. virgaurea L. – з. обыкновенный

Полифенолы:

Флавоноиды: рутин, кверцетин, кверцитрин, астрагалин , изокверцитрин, рамноглюкозид кемпферола , кемпферол, изорамнетин, нарциссин, глюкорамнозид рамнетина , никотифлорин, афзелин (3–рамнозид кемпферола) , кверцетин–D–глюкозид, кемпферол–D–глюкозид, кемпферол–3–О–рутинозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая , кофейная, изохлорогеновая гидроксикоричная, хинная Фенольные соединения: лейокарпозид , виргауреозид А Кумарины: эскулетин, эскулин Дубильные вещества Антоцианы: 3–гентиобиозид цианидина Сапонины: виргауреасапонины (виргауреасапонин–3 ), в гидролизате виргауреагенин А , виргауреагенин В (олеаноловая кислота), виргауреагенины С, D, Е, виргауреагенины G (полигаловая кислота), Н , солидагосапонин 21 – 30 (рисунок 1.

2) , байогенин Дитерпеноиды Тритерпеноиды Полиацетиленовые соединения: 2,8–цис–цис–матрикариаэфир, матрикариа–лактон, лахнофиллумлактон Бром 0,055% Углеводы: полисахариды 3-8%, в гидролизате галактуроновая кислота, галактоза, глюкоза, арабиноза, ксилоза, рамноза Фитоэкдизоны Жирное масло 14,4% Каучук Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен, –элемен, гермакрен В, гермакрен D, –кадиен, –пинен, –мирцен Солидагосапонин 21 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 26 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=A Солидагосапонин 22 R1=Xyl; R2=H; R3=A; R4=H Солидагосапонин 27 R1=H; R2= Glc; R3=H; R4=H Солидагосапонин 23 R1=Xyl; R2=H; R3=Api–Ac; R4=A Солидагосапонин 28 R1=Glc; R2=H; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 24 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=B Солидагосапонин 29 R1=H; R2= Glc; R3= Api; R4=Ac Солидагосапонин 25 R1=Xyl; R2=H; R3=H; R4=H Солидагосапонин 30 R1=Glc; R2=H; R3=H; R4=H

Рисунок 1.2 – Солидагосапонины

Solidago canadensis L. – золотарник канадский

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол, кверцетин, изорамнетин, астрагалин, кемпферол–3–О–глюкорамнозид, кверцетин–3–О–глюкопиранозид, рутин, кверцетин– 3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–глюкопиранозид, изорамнетин–3–О–рутинозид (нарциссин), рамнетин–3–О–глюкорамнозид, изорамнетин–3–О–(611–О–ацетил)–глюкопиранозид Фенолкарбоновые кислоты: кофейная кислота Кумарины: скополетин, умбеллиферон Тритерпеновые сапонины: гликозиды олеаноловой кислоты, канаденсисапонины 1 – 8, 3–(3R–ацетоксигексадеканоилокси)–люп–20(29)–ен, 3–(3– кетогексадеканоилокси)–люп–20(29)– ен, 3–(3R–ацетоксигекса-деканоилокси)–29–нор–люпан–20–он,3–(3–гетогексадеканоилокси)– 29– нор–люпан– 20–он , байогенинсапонины 1 – 4 Компоненты эфирного масла: лимонен, –элемен,–элемен, гермакрен В, гермакрен D , –пинен, –мирцен , 3–эпи––кубебен, 3–эпи–– кубебен Полиацетиленовые соединения: матрикариаэфир, клеродан, колавеноловая кислота Аминокислоты, горечи, полисахариды S. gigantea Ait. – з. гигантский

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид, кемпферол Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая Компоненты эфирного масла: –пинен, –мирцен , эпи–ториленол, 1,10–секо–эудесма–4(15), 5(10)–диен–1–aл, цис–эудесм–4(10)– ен–1–oн Сапонины: гигантеасапонины 1 – 6 S. virgaurea var. gigantean

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–О–рутинозид Тритерпеноиды: эритродиол–3–ацетат , –амирина ацетат Витамины: –токоферол–квинон Производное изопрена: транс–фитол Компоненты эфирного масла: –диктиоптерол

–  –  –

S. decurrens Lour. – з. низбегающий

Полифенолы:

Фенолкарбоновые кислоты: кофейная, хлорогеновая Фенольные соединения: лейокарпозид Ароматические соединения: 5–бензилметоксибензоат, 3–метокси–4– ацетоксициннамоилангелат, 3,5–диметокси–4–ацетосициннамоилангелат, 2– метоксибензил–2,3,6–триметоксибензоат, 2–метоксибензил–2,6– диметоксибензоат, бензил–2–гидрокси–6–метоксибензоат, метил (2E,8Z)– декадиен–4,6–диноат, бензил–2,6–диметоксибензоат, метил (2Z,8Z)–декадиен– 4,6–диноат Антоцианы: цианидин–3–глюкозил–гликозид Стероиды: ситостерин Тритерпеновые сапонины: Полиацетиленовые соединения

–  –  –

S. rugosa Mill. – з. морщинистый Дитерпеноиды: (+)–18–тиглоксиманнол, 18–гидроябиета–7,13(14)–диен, 18–тиглоксиябиета–7,13(14)–диен, 7–гидро–13,15–дигидроксиябиета–8 (14)– ен–18–оик кислота, 15–гидройдегидроабиетик кислота S. altissima L. – з. высочайший

Полифенолы:

Флавоноиды: кемпферол–3–O–рутинозид–7–O––D–апиофуранозид Фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая кислота, кофейная кислота и ее производные) Фенольные гликозиды: транс–тилирозид Ацетиленовые соединения и терпеноиды: дегидроматрикариалактон, Е,7–ацетоксилколавеновая кислота (солидагоновая кислота), колавенол .

1.5 Использование сырья видов рода Золотарник

Применение золотарника в народной медицине В народной медицине настой и отвар травы золотарника обыкновенного используется как диуретическое, антисептическое, противовоспалительное средство при болезнях почек и мочевого пузыря (мочекаменная болезнь, холецистит, язвенный цистит, энурез), гипертрофии предстательной железы. Однако, сфера применения золотарника намного шире. Он оказывает вяжущее, потогонное, отхаркивающее, гемостатическое действие, применяется при желчнокаменной болезни, сахарном диабете, бронхиальной астме, туберкулезе легких, острых респираторных инфекциях, остром ларингите, ангине, коклюше, подагре, артритах, энтерите, колите, меноррагии, белях, экземе, асците. В Молдавии, Белоруссии соцветия используют наружно в смеси со сливками, свиным жиром или сливочным маслом при туберкулезе кожи, дерматитах, ожогах, ревматизме.

В Коми АССР, на Кавказе, в Сибири – при скрофулезе. В китайской народной медицине семена золотарника обыкновенного применяют для разжижения крови и устранения вздутия кишечника, а также при нарушениях менструального цикла, холере, диарее, появлении крови в моче у детей. На Кавказе настойки подземной части золотарника применяются в качестве ранозаживляющего средства .

Применение золотарника в научной медицине Золотарник обыкновенный, з. канадский и з. гигантский включены в Европейскую фармакопею , з. канадский и з. гигантский – в Британскую травяную фармакопею . В СССР была разработана ФС «Трава золотарника канадского» .

Для видов рода Золотарник установлен целый спектр фармакологической активности.

Мочегонная активность Флавоноидная фракция золотарника обыкновенного в дозе 25 мг/кг показывала увеличение диуреза у крыс на 88% через 24 ч по сравнению с контрольным образцом (NaCl, 5 мл, пероральное введение), при этом наблюдалось снижение ночной экскреции калия и натрия и увеличение экскреции кальция.

Значительное увеличение диуреза у крыс с повышенным выведением натрия, калия и хлорид–ионов наблюдалось после приема внутрь золотарника обыкновенного (0,3% флавоноидов, 4,64 мл / кг и 10,0 мл / кг). Причем низкая доза оказалась более эффективной .

Противовоспалительная активность Противовоспалительная активность сапонинов золотарника обыкновенного была испытана на модели отека у крыс. В результате наблюдалось значительное снижение отека после внутривенного введения 1,25-2,5 мг/кг комплекса тритерпеновых сапонинов .

Лабдановые дитерпены, выделенные из золотарника чилийского, при хлоровородно–этанольно индуцированных поражениях желудка у мышей проявили гастропротектиновую активность .

Дитерпен солидагогенон, содержащийся в водном экстракте из соцветий золотарника чилийского, также проявил гастропротективную активность .

На крысах был протестирован препарат Phytodolor на противовоспалительную, обезболивающую и жаропонижающую активность. Активность была такой же, как и у стандартных образцов салицилового спирта и индометацина .

Сапонины, флавоноиды и кофейная кислота, выделенные из золотарника обыкновенного ингибировали активность лейкоцитарной эластазы и протеазы, участвующих в прогрессировании воспаления. Сапонины стимулировали синтез и высвобождение глюкокортикоидов в надпочечниках .

Водный экстракт золотарника обыкновенного значительно подавлял воспалительную реакцию на коже морских свинок, индуцированную рентгеновским излучением .

46% водно–спиртовый экстракт золотарника чилийского оказывал противовоспалительную активность за счет ингибирования дигидрофолат редуктазы.

Лейокарпозид, выделенный из золотарника чилийского, оказывал противовоспалительный и болеутоляющий эффект .

Выделенная из золотарника гигантского 3,5–ди–О–кофейная кислота обладала противовоспалительными свойствами, не имея побочных эффектов, и поэтому исследовалась как потенциальное лекарственное средство .

Антиоксидантная активность Водно–спиртовый экстракт золотарника обыкновенного как компонент препарата Phytodolor ингибировал образование активных форм кислорода .

Анальгетическая активность Экстракт золотарника обыкновенного проявлял анальгетическую активность, воздействуя на брадикининовые рецепторы .

Установлена эффективность жидкого экстракта золотарника чилийского при лечении люмбаго: в течение 15 дней кожу смазывали гелем, содержащим 5% экстракта золотарника чилийского, и добились значительного анальгетического эффекта .

Спазмолитическая активность Наличие флавоноидов (кверцетин и кемпферол) в золотарнике обыкновенном обуславливало установленное вазодилаторное действие, зависящее от ингибирования протеинкиназы С, ингибирования фосфодиэстеразы и циклических нуклеотидов, а также уменьшения поступления ионов Ca 2 + .

Антибактериальная активность

Эфирное масло золотарника обыкновенного и з. канадского оказывало антибактериальную активность в отношении Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa . Сухие и жидкие водно–спиртовые экстракты золотарника обыкновенного, з. канадского, з. гигантского эффективны против Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Chlamydia pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa . Водный экстракт корневищ золотарника чилийского подавлял активность Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa .

Противогрибковая активность

Деацилированные тритерпеновые сапонины золотарника обыкновенного проявляли противогрибковую активность в отношении видов рода Candida (Candida аlbicans, C. tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis, C. pseudotropicalis, C.

guilliermondi, C. glabrata и Cryptococcus neoformans) выше, чем смесь сапонинов . В других экспериментах показана противогрибковая активность спиртового экстракта золотарника обыкновенного в отношении дерматофитов, особенно в отношении Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum и M. canin.

Противогрибковая активность в отношении Candida albicans была очень низкой.

Противомикробную активность также проявляет и золотарник гигантский .

Противоопухолевая активность

Тритерпеновые сапонины проявляют противоопухолевую активность . Значительная противоопухолевая активность виргауреасапонина Е, выделенного из золотарника обыкновенного, в дозе 1 мг/кг/сут. была установлена в экспериментальной модели саркомы у мышей . В другой серии экспериментов был продемонстрирован противоопухолевый эффект полисахаридов золотарника обыкновенного в отношении простаты, рака молочной железы, меланомы и рака легких. Рост опухоли подавлялся в дозе 5 мг/кг .

Противоопухолевая активность наблюдалась у гексанового, хлороформного, этилацетатного и 50% водно–спиртового экстракта золотарника канадского в отношении клеток линии HeLa и MCF–7 .

Иммуномодулирующая активность Иммуномодулирующая активность (индукция макрофагов и активация NK–клеток), а также противоопухолевая активность тритерпенового сапонина виргауреасапонина Е была показана в экспериментах in vitro .

Антиагрегантная активность Дитерпены, содержащиеся в водном экстракте золотарника чилийского, ингибировали АДФ–индуцированную агрегацию тромбоцитов в крови человека; а сапонины блокировали кальциевые каналы, что свидетельствовало об антиагрегантной активности золотарника чилийского .

Сырье золотарника входит в состав 21 наименования мирового фармацевтического рынка, из которых в России представлены 6 (таблица 1.2).

–  –  –

Золотарник обыкновенный имеет медоносное значение ; является кормовым растением для северных оленей, амурского горала и бобров. Однако, для овец это растение ядовито .

Применялся в качестве дубильного и красильного растения, из травы и цветков которого извлекали желтую и коричневую краски .

Эфирное масло золотарника обладает оригинальным запахом .

Листья золотарника используются как ароматическая приправа .

Таким образом, виды рода золотарник являются довольно распространенными растениями, содержащими богатый комплекс БАС, нашедшими свое применение не только в медицине, но и в других сферах деятельности.

ВЫВОДЫ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

1. В результате изучения литературных данных установлено, что фитохимическое изучение золотарника кавказского не проводилось, но имеются данные, что для видов рода Золотарник установлено присутствие таких классов биологически активных соединений, как флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, кумарины, сапонины, полиацетиленовые соединения, полисахариды, ароматические соединения.

2. Изученные в большей или меньшей степени виды рода Золотарник обладают широким спектром фармакологической активности: диуретическим, спазмолитическим, противовоспалительным и т.д.

3. Приведенные сведения о культивировании видов рода Золотарник свидетельствуют о перспективности изучения возможностей выращивания золотарника кавказского.

4. Анализ данных литературы показал, что золотарник кавказский является фармакогностически неизученным растением Кавказа.

ГЛАВА 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

–  –  –

Объектами исследования являлись трава и корневища с корнями золотарника кавказского (рисунок 2.1). Трава заготавливалась в начале цветения путем срезания верхней части длиной 25-30 см без грубых оснований стеблей с изменившими окраску листьями в 2009–2013 гг. на территории Северного Кавказа:

Республика Карачаево–Черкесия, Карачаевский район (перевал Гумбаши, ущелье р. Даут к перевалу Учкулан, верховье р. Даут на перевале Эпчик), Республика Кабардино–Балкария, Чегемский район (г. Чегем) и Зольский район (урочище Джилы–Су), также использовалась трава, заготовленная от культивируемых растений в 2011– 2013 гг. Траву з. кавказского сушили на воздухе в тени под навесами и в хорошо проветриваемых помещениях. После сушки из сырья удаляли часть стеблей, почерневшие листья и посторонние примеси. Корневища с корнями заготавливали от культивируемого золотарника кавказского ранней весной 2014 г., выкапывая вручную. Корневища с корнями очищали от остатков надземных частей и земли, промывали, сушили в хорошо проветриваемом помещении.

Рисунок 2.1 – Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.

–  –  –

2.2.1 Химические реакции Наличие биологически активных веществ в траве и корневищах с корнями з. кавазского устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций .

Для обнаружения флавоноидов использовали спиртовое извлечение (спирт этиловый 70%) в соотношении 1:10, с которым проводили цианидиновую пробу (восстановление магнием в присутствии хлористоводородной кислоты концентрированной) и реакцию с алюминия хлоридом.

Для установления наличия тритерпеновых сапонинов готовили водное извлечение 1:10 кипячением на водяной бане в течение 10 минут, охлаждали и фильтровали. В 2 пробирки помещали по 2 мл фильтрата. В первую пробирку прибавляли хлористовородную кислоту 0,5 М, во вторую – натрия гидроксид 0,5 М. Пробирки встряхивали и наблюдали пену как в кислой, так и в щелочной средах (тритерпеновые сапонины). Для проведения реакции Либермана– Бурхарда навеску травы золотарника кавказского (10,0 г) обезжиривали бензолом, проводили экстракцию последовательно хлороформом и метанолом. Метанольное извлечение упаривали и к сухому остатку прибавляли укусный ангидрид и серную кислоту концентрированную.

Присутствие дубильных веществ определяли в водном извлечении (массо–объемное соотношение 1:10, продолжительность экстракции 5 мин) по реакции с раствором квасцов железоаммонийных.

Для обнаружения кумаринов была использована лактонная проба. Готовили извлечение из сырья золотарника кавказского спиртом этиловым 95% в соотношении 1:10 путем кипячения в течение 15–20 мин на водяной бане с обратным холодильником. К 5 мл приготовленного извлечения прибавляли 10 капель спиртового раствора натрия гидроксида 10% и нагревали на водяной бане.

Затем добавляли 10 мл воды и 15 капель хлористоводородной кислоты 10%.

Идентификацию аминокислот проводили в кислотном извлечении (хлористоводородная кислота, массо–объемное соотношение 1:10, температура 70 С, 10 мин) по биуретовой реакции и реакции с нингидрина раствором.

Обнаружение углеводов осуществляли с помощью реакции Бертрана и со спиртом этиловым 95%.

2.2.2 Хроматографические методы исследования Для проведения хроматографического анализа использовалась хроматографическая бумага «Filtrak», а также пластинки «Sorbfil» (ПТСХ–П–В–УФ).

Пластинки для ТСХ–анализа предварительно выдерживали в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 1 часа с целью их активирования. Методика обнаружения: на линию старта хроматографической пластинки размером 1515 или хроматографической бумаги наносили с помощью микрошприца по 5 мкл или 10 мкл соответственно извлечения из травы з. кавказского. Параллельно наносили по 5 мкл растворов рабочих стандартных образцов. Хроматографические камеры предварительно насыщали парами растворителей в течение 40 – 60 мин в случае ТСХ и в течение 12–16 часов в случае бумажной хроматографии. Хроматографирование осуществляли восходящим способом в герметично закрытой камере, содержащей соответствующую систему растворителей.

Анализ хроматограммы проводили, когда фронт растворителя достигал 13 см для ТСХ или 40 см для БХ. После хроматографирования пластинки высушивали на воздухе под вытяжным шкафом, просматривали в видимом и УФ–свете, обрабатывали определенным реагентом с помощью пульверизатора .

ВЭЖХ использовалась для анализа фенольных соединений и органических кислот. Анализ проводили на хроматографе фирмы «Gilston» с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «Мультихром» для «Windows».

Идентификацию разделенных веществ проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме пробы, со временами удерживания растворов стандартных образцов. Оценку количественного соотношения идентифицированных веществ проводили по площади пиков, используя метод внутренней нормализации .

Для установления моносахаридного состава углеводов проводили их кислотный гидролиз. Нейтральные сахара идентифицировали методом ГЖХ. ГЖХ

– анализ образцов снимали на хроматографе Сhrom-5 с пламенно– ионизационным детектором, стеклянная колонка (1,5 м 0,3 м) 5% Silicone XE

– 60 на хроматоне NAW – 0,2000,250 меш, 210 °С; газ–носитель – гелий, 30 мл/мин в виде ацетатов альдононитрилов.

Также для анализа БАС травы золотарника кавказского использовали хромато–масс–спектрометр AT–5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс– спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2 – 950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату.

Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР–5ms Хьюлетт–Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 ° С со скоростью 7 град/мин. Температура инжектора и интерфейса 280 °С. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс–спектров NIST.

2.2.3 Спектральные методы Метод УФ–спектрофотометрии был использован для качественного и количественного определения флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и тритерпеновых гликозидов. УФ–спектры поглощения регистрировали на спектрофотометрах СФ–56 и СФ–2000 в кюветах с толщиной слоя 10 мм в области от 200 до 600 нм .

ИК–спектры образцов углеводов снимали на спектрофотометре Perkin– Elmer model 2000 в таблетках с KBr в соответствии с требованиями ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области» .

Определение содержания макро– и микроэлементов в траве з. кавказского проводили с помощью полуколичественного спектрального метода. Анализ был проведен в центральной испытательной лаборатории «Кавказгеолсъемка». Изучение элементного состава осуществляли на дифракционном спектрографе ДФС–8–1 методом испарения.

2.2.4 Титриметрические методы Количественное определение дубильных веществ в траве золотарника кавказского проводили методом перманганатометрического титрования по методике ГФ XI, вып. 1 . Содержание свободных органических кислот определяли алкалиметрическим методом титрования по методике ГФ XI, вып. 2, ст.

39 «Плоды шиповника» .

2.2.5 Гравиметрические методы Изучение углеводов травы золотарника кавказского проводили гравиметрически по методу, изложенному в монографии Н.К. Кочеткова и M. Sinner .

2.2.6 Ресурсоведческие исследования Ресурсоведческие исследования были проведены согласно методическим указаниям .

Учетные площадки закладывались площадью 1 м 2, на одной учетной площадке помещалось в среднем 5–6 взрослых экземпляров растений. При этом форма площадки (прямоугольная, квадратная, округлая) существенной роли не играла.

После закладки учетных площадок на каждой из них собирали всю сырьевую фитомассу. Собранное сырье после сушки взвешивали.

Расчеты проводили с помощью формул (1, 2, 3, 4):

–  –  –

2.2.7 Фармакологические методы исследования Изучение «острой» токсичности проводилось по методу Кербера .

«Острая» токсичность была изучена на 42 аутбредных белых мышах самцах весом 22-30 г, прошедших карантин в течение 10 дней. Экстракт золотарника кавказского вводили внутрижелудочно при помощи зонда. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество физиологического раствора. Наблюдение за опытными животными проводилось в течение 2–х недель, в первый день непрерывно. Фиксировалось общее состояние животных, особенности их поведения, интенсивность и характер двигательной активности, время наступления смерти после введения препарата. Все расчеты проводились методом наименьших квадратов с использованием пробит анализа и обрабатывались с помощью программы «StatPlus 2009».

Изучение диуретической активности сухого экстракта золотарника кавказского было проведено на 24 белых крысах–самцах линии «Wistar» массой 300–450 г. Мочу собирали утром натощак в течение 2–х часов после 2,5% водной нагрузки. Сухой экстракт золотарника кавказского в виде водного раствора вводили за час до создания водной нагрузки. Интактная группа животных получала эквиобъемное количество воды.

Антибактериальное действие изучали в соответствии с ГФ XII .

2.2.8 Отбор проб для анализа Отбор проб для анализа осуществляли в соответствии с ОФС 42–0013–03 «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб»

2.2.9 Методы макро– и микроскопического анализа сырья Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья проводили визуально по ГФ XI .

Анатомические исследования выполняли по методике ГФ XI и Г.Г.

Фурста . Микропрепараты изучали с помощью микроскопов «Биолам» и «Биомед». Использовали объективы 4, 8, 10, 40, окуляр 16. Микрофотосъемка выполнена с использованием цифровых камер Nikon Coolpix и L33.0 mp cmos microscope digital camera eyepiece new.

Для проведения микроскопического анализа использовали временные препараты, приготовленные из высушенного сырья. Цельное сырье просветляли в системе спирт этиловый – глицерин – вода в соотношении 1:1:1. Срезы, полученные вручную с помощью лезвия, окрашивали реактивом на одревеснения – спиртовый раствор флороглюцина 1% и раствор серной кислоты 50%. Анатомическое строение рассмотрено в соответствии с ГФ XI, вып. 1 .

2.2.10 Определение числовых показателей Определение влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% кислоте хлористоводородной, экстрактивных веществ в траве золотарника кавказского проводили по методикам, описанным в ГФ XI изд., вып. 1 и 2 , а также ГФ XII изд. .

2.2.11 Валидация методики количественного определения Валидация методики количественного определения флавоноидов в траве золотарника кавказского проводилась в соответствии руководством ICH «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» .

Фармакология, клиническая фармакология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...» стоматология Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор...»

«ЕВСЕЕВА ЕЛЕНА ВИКТОРОВНА ОПТИМИЗАЦИЯ СИСТЕМЫ КОМПЛЕКСНОГО КЛИНИКО – РАДИОЛОГИЧЕСКОГО СКРИНИНГА ЗАБОЛЕВАНИЙ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Рожкова Надежда Ивановна Москва – 2015г....»

«Каплунов Кирилл Олегович Оптимизация отношений врача и родственников ребенка-пациента в клинике детских инфекций 14.02.05 – социология медицины Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Любовь Васильевна Крамарь Волгоград – 201 СОДЕРЖАНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1.Клиника детских инфекций как особый раздел педиатрии 1.2.Модели...»

14.01.12 – онкология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук научные руководители – доктор медицинских наук профессор А.М. Беляев САНКТ-ПЕТЕРБУРГ ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.. ВВЕДЕНИЕ.. Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.. 13 1.1. Введение.. 13 1.2....»

«Кудрявцев Виталий Вячеславович Современные проявления эпидемического процесса ротавирусной инфекции и пути оптимизации эпидемиологического надзора 14.02.02 ЭПИДЕМИОЛОГИЯ Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель:...»

«Мисюрина Анна Евгеньевна ЭКСПРЕССИЯ MYC и BCL2 У БОЛЬНЫХ ДИФФУЗНОЙ В-КРУПНОКЛЕТОЧНОЙ ЛИМФОМОЙ 14.01.21 – гематология и переливание крови Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: д.б.н. Ковригина А.М. к.м.н. Барях Е.А. МОСКВА – 2015 г. ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ ЦЕЛЬ...»

«МЕЛКОНЯН ГЕОРГИЙ ГЕННАДЬЕВИЧ ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ И ЕЕ ОСЛОЖНЕНИЙ хирургия - 14.01.17 Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Мумладзе Р.Б. Москва ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ..4 ВВЕДЕНИЕ..6 Глава 1. ЖЕЛЧНОКАМЕННАЯ БОЛЕЗНЬ И МЕТОДЫ ЕЕ ЛЕЧЕНИЯ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)..21...»

«СИТДИКОВ РУСТАМ ЗИННЯТУЛЛОВИЧ «Гигиеническая оценка условий труда и разработка медикопрофилактических мероприятий для сохранения здоровья работников пищевой промышленности (на примере кондитерской фабрики)» 14.02.01 – гигиена ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских...»

«Юнеева Елена Андреевна МУЗЫКАЛЬНАЯ КУЛЬТУРА ИТАЛИИ XVII–XVIII вв.: ФЕНОМЕН БАРОЧНОЙ ОПЕРЫ 24.00.01 – теория и история культуры Диссертация на соискание ученой степени кандидата исторических наук Научный руководитель: кандидат исторических наук, доктор философских наук, профессор, Кибасова Галина...»

«ХАСИХАНОВ Султан Султанбекович ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И КАЧЕСТВО ЖИЗНИ ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ОГНЕСТРЕЛЬНЫХ РАНЕНИЙ ГРУДИ, ЖИВОТА И СОСУДОВ КОНЕЧНОСТИ 14.01.17 – хирургия Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук А.Я. Дадаев Научный консультант:...»

«Антонив Татьяна Васильевна Гемангиомы и хемодектомы ЛОР-органов (клиника, диагностика, лечение) 14.01.03 – болезни уха, горла и носа Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант д.м.н., проф. Попадюк В.И. Москва – 2015г. ОГЛАВЛЕНИЕ. ВВЕДЕНИЕ.. 4 ГЛАВА 1 Современное состояние проблемы клиники, диагностики и лечения сосудистых...»

«ГАБДУЛЛИН ФАИЛЬ ХАРИСОВИЧ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА МЯСА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В РАЦИОНЕ АЭПК «БИОГУММИКС» 06.02.05 – ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарносанитарная экспертиза 03.03.01 – физиология Диссертация на соискание...»

«Прилипко Нина Станиславовна СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ОРГАНИЗАЦИИ МЕДИЦИНСКОЙ РЕАБИЛИТАЦИИ ВЗРОСЛОГО НАСЕЛЕНИЯ 14.02.03 – Общественное здоровье и здравоохранение ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: д.м.н., профессор И.М. Сон Москва – ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ... Глава...»

« ИНТОКСИКАЦИЕЙ 05.26.02 безопасность в чрезвычайных ситуациях Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук...»

2016 www.сайт - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам , мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.

Первые упоминания о целебных свойствах золотарника датируются ещё XVI веком, и за прошедшие столетия люди научились применять траву для лечения многих болезней. Как правильно употреблять чудодейственное растение Золотарник, какие болезни поможет вылечить и кому от употребления лучшее отказаться, расскажем далее.

Растение золотарник – описание, фото

Золотарник (золотушник или желтоцвет) – травянистый многолетник семейства Астровые, чьё название с латыни переводится как «дарующий здоровье». Родина растения – Северная Америка, но распространение оно получило по всему миру.

Эта душистая декоративная трава бывает высокорослой (высотой до 200 см) и карликовой (не более 40 см в длину). Стебель продольный, прямой, заканчивается соцветием в форме кисти с цветками золотистого цвета длиной до 10 мм. Внешне цветущий золотушник напоминает садовую мимозу.

Корни мясистые, крупные, но расположены близко к поверхности грунта. Листья многолетника длинные с зазубринами по краям, овальной или продолговатой формы. Плоды – семянки цилиндрической формы длиной 4–5 мм. Плодоношение начинается в сентябре, сразу после цветения, которое продолжается все летние месяцы.

Желтоцвет – неприхотливое и живучее растение. Он предпочитает илистые или глинистые почвы в районах водоёмов, на полянах и в лесах. Притом одна особь способна дать 10–11 тысяч семян за сезон, из которых 90–95% взойдёт.

Род растения включает в себя более сотни видов, самые распространённые из которых:

• обыкновенный;
• канадский;
• гибридный;
• высочайший;
• морщинистый;
• низбегающий;
• даурский.

Желтоцвет применяется в ветеринарии, химической промышленности, но наибольшее применение получил в народной медицине и гомеопатии.

Золотарник канадский

Канадский золотушник – декоративное растение, но на территории России распространены дикорастущие виды. В отличие от золотушника обыкновенного, не ядовит и не содержит токсичных компонентов в составе. Ареал распространения – Северная Америка, откуда и название.

Высокорослое растение, считается прародителем других видов желтушника крупного. Эта разновидность в народной медицине используется для лечения воспалительных процессов в почках, осложнённых отёчностью тканей и органов.

Сбор травы осуществляется в самом начале цветения – в июле, первой половине августа. При заготовке этого вида не используются стебли – они слишком жёсткие для перемалывания, поэтому после сбора сырья оставляют только листья и раскрывающиеся соцветия.

Золотарник обыкновенный

Этот вид растения называют также золотой веткой или золотой розгой благодаря характерному внешнему виду. Распространён на территории Европы, в Средней Азии, на Средиземноморье и в Скандинавии. В России золотарник обыкновенный можно встретить в Сибири, на Кавказе и в европейской части страны.

Лечебными свойствами обладает надземная часть растения: листья, соцветия, верхняя часть стебля, реже – корневище. Отвар этой разновидности целебной травы используется для лечения заболеваний дыхания и слуха, для полосканий при респираторных заболеваниях.

Желтоцвет обыкновенный относится к ядовитым растениям, поэтому корни и основания стеблей многолетника в народных рецептах применяются с осторожностью.